[發明專利]一種高免疫活性酵母細胞壁多糖的提取方法

有效

• 申請號: 202011586062.7
• 申請日: 2020-12-29
• 公開（公告）號: CN112760346B
• 公開（公告）日: 2022-09-09
• 發明（設計）人: 江建梅;徐婷婷;李丹丹;姜峰;劉立娟;周雪玲;楊文嬌;劉銀升;陳志穎
• 申請（專利權）人: 唐山拓普生物科技有限公司;唐山泰普紐特生物科技有限責任公司
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14;C12P19/04;C12N1/06;C12R1/865
• 代理公司: 石家莊領皓專利代理有限公司 13130
• 代理人: 何鑫鑫

1.一種高免疫活性酵母細胞壁多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、啤酒酵母預處理：將啤酒酵母與水按照質量體積比為1:(10～20)的比例混合，充分攪拌均勻，4000r/min離心5～10min，反復洗滌，經100目篩過濾，去除可見雜質，后加入與水等體積的5％酒石酸溶液，攪拌靜置除味，4000r/min離心5～10min，得到啤酒酵母預處理物；

S2、凍融法破壁：將預處理的啤酒酵母泥置于-20℃下冷凍1～2h，再置于80℃水中驟然升溫使其融化，后4000r/min離心5～10min，如此反復3次，得沉淀物；

S3、酶解：將S2所得的沉淀物與蒸餾水按1:(10～15)的體積混合，用鹽酸調pH值為6～8，加入蛋白酶、多糖酶、復配促進劑，進行超聲波處理，將混合物5000r/min離心5～10min，收集上清液；

S4、洗滌干燥：上清液用1～2倍體積的質量濃度為60％～85％乙醇沉淀，沉淀物丙酮洗滌兩次，真空干燥至恒重即得酵母細胞壁多糖干品；

所述步驟S3多糖酶包括2.5～5‰甘露聚糖酶、0.2～1‰葡聚糖酶、0.2～1‰纖維素酶，所占比例按照啤酒酵母干料質量比計算；

所述復配促進劑為葡萄糖酸錳和葡萄糖酸鈷，其質量比為(4～5):1；

所述復配促進劑的質量為蛋白酶的5～10％。

2.根據權利要求1所述的一種高免疫活性酵母細胞壁多糖的提取方法，其特征在于，所述步驟S3中超聲波處理的條件為溫度45℃，超聲波功率50W，時間4S，間歇5S，超聲時間30min。

3.根據權利要求1所述的一種高免疫活性酵母細胞壁多糖的提取方法，其特征在于，所述蛋白酶包括無花果蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶中的一種或多種。

4.根據權利要求1所述的一種高免疫活性酵母細胞壁多糖的提取方法，其特征在于，所述蛋白酶加入量為啤酒酵母干料的0.1～0.5％。