[發明專利]一種Cangrelor中間體雜質的HPLC檢測方法

有效

• 申請號: 202011580246.2
• 申請日: 2020-12-28
• 公開（公告）號: CN112630349B
• 公開（公告）日: 2022-12-09
• 發明（設計）人: 丁惠;張欣怡;王華
• 申請（專利權）人: 鹽城師范學院
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 泉州凡碩知識產權代理有限公司 35257
• 代理人: 張施露

本發明涉及一種Cangrelor中間體雜質的HPLC檢測方法。具體而言，本發明涉及一種Cangrelor中間體腺苷?2?硫酮的副產物取代嘌呤和二硫化物含量的HPLC檢測方法，該方法操作簡單、快速、準確度精密度良好。

技術領域

本發明屬于藥物制劑領域，具體涉及一種Cangrelor中間體雜質的HPLC檢測方法。

背景技術

制藥工藝中引入的雜質常稱之為有關物質。藥物的有關雜質項目的檢查需要有明確的針對性。藥品標準中的雜質檢查項目,應包括藥物在質量研究和穩定性考察中檢出的,并在批量生產中出現的雜質和降解產物。Cangrelor是一種短效血小板P2Y12的可逆抑制劑，此藥物主要為了預防成人患者在經皮冠狀動脈介入治療(PCI)過程中因凝血而造成的冠狀動脈柱塞。2016年6月22日，美國FDA批準了Medicine公司的抗血小板藥物注射劑Cangrelor上市。

ZL94191559.X中記載了坎格雷洛的合成方法。其中腺苷-2-硫酮是合成Cangrelor的重要中間體，又可稱作2-硫代腺苷，CAS登記號為43157-50-2。該中間體的質量直接影響到終產品Cangrelor的產品質量。CN201710719085.2公開了腺苷-2-硫酮的HPLC檢測方法，然而該方法無法完全檢出產品中所有的雜質。

發明內容

本發明的目的在于提供一種操作簡單、快速、準確度精密度良好的分析方法，用于檢測腺苷-2-硫酮副產物取代嘌呤和二硫化物的含量測定。

發明人通過對Cangrelor的重要中間體腺苷-2-硫酮的HPLC方法研究、雜質分析和結構確證，發現了其主要存在兩種雜質化合物，分別為取代嘌呤和二硫化物。其中二硫化物雜質為首次確證。然而這2種副產物都有溶解度差、反相色譜中保留弱等特點，且現有技術中并沒有針對這兩種雜質分離度較好的HPLC檢測方法。

本發明提供了一種Cangrelor中間體腺苷-2-硫酮的副產物取代嘌呤和二硫化物含量的HPLC檢測方法，所述方法包括：

d、樣品輔助溶解得到高濃度初始溶液；

e、初始溶液進行液相色譜兼容性稀釋；

f、反相液相色譜進行分離分析，采用的流動相包括：A相，由0.14％Na₃PO₄水溶液(pH6)構成；B相，由0.14％Na₃PO₄(pH6)甲醇水溶液(甲醇：水1:1v/v)構成，進行梯度洗脫；

g、按外標法以峰面積計算樣品中取代嘌呤和/或二硫化物的含量。

在某些實施方式中，取代嘌呤和二硫化物可以單獨或同時檢測。

在某些實施方式中，所述步驟a中的樣品采用DMSO溶解。

在某些實施方式中，所述步驟a中初始溶液濃度在1-20mg/mL。

在某些實施方式中，所述步驟b中初始溶液采用含0.14％Na₃PO₄(pH6)的甲醇水(1:3v/v)溶液稀釋。在某些實施方式中，以液相色譜法0min時刻的流動相(含0.14％Na₃PO₄(pH6)的甲醇水(1:3v/v))為稀釋液，稀釋初始溶液，配制得到樣品溶液以及系列對照品溶液，制得溶液用0.22μm微孔濾膜過濾。

在某些實施方式中，所述步驟b中對照品溶液是取代嘌呤和二硫化物的其中一種對照品溶液或2種物質的混合溶液。

在某些實施方式中，所述步驟b中對照品溶液的濃度范圍為2μg/mL-42μg/mL。