[發明專利]用于保存生物樣本中核酸的樣本保存液及其使用方法

在審

• 申請號: 202011580147.4
• 申請日: 2020-12-28
• 公開（公告）號: CN112626169A
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發明（設計）人: 張佳斌;鄒永龍;曲峰;何宗順
• 申請（專利權）人: 蘇州白堊紀生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/24
• 分類號: C12Q1/24
• 代理公司: 北京格允知識產權代理有限公司 11609
• 代理人: 譚輝

1.一種用于保存唾液中核酸的樣本保存液，所述樣本保存液包含：細胞裂解劑、緩沖劑、螯合劑、鹽離子、抗微生物劑和核酸保護劑；其中，所述樣本保存液包含：

質量體積百分比為0.1-50％的細胞裂解劑，

終濃度為10-500mM的緩沖劑，

終濃度為0.1-200mM的螯合劑，

終濃度為10-1000mM鹽離子，

質量體積百分比為0.05-25％的抗微生物劑，和

質量體積百分比為0.05-5％的核酸保護劑。

2.如權利要求1所述的樣本保存液，所述樣本保存液的pH為5.5-9.5，優選6.0-8.2。

3.如權利要求1或2所述的樣本保存液，所述細胞裂解劑為鹽酸胍、異硫氰酸胍、硫氰酸鈉、硫氰酸鉀、碘化鈉、碘化鉀、高氯酸鈉、高氯酸鉀、亞硫酸氫鈉、亞硫酸氫銨、硫酸銨、尿素、去污劑中的一種或任意幾種的組合；其中，所述去污劑為陰離子表面活性劑、非離子表面活性劑、陽離子表面活性劑或兩性表面活性劑；和/或

其中，所述緩沖劑為三羥基氨基甲烷、4-羥乙基哌嗪乙磺酸、乙磺酸鈉、乙酸鈉、檸檬酸、鄰苯二甲酸氫鉀、硼酸、磷酸二氫鉀、碳酸二氫鈉、碳酸鈉、碳酸氫銨、二乙醇胺、丙磺酸、檸檬酸鈉、磷酸二氫鈉、乙酸銨、亮氨酸、N,N-二羥乙基甘氨酸、3-(環己胺)-1-丙磺酸、3-嗎啉丙磺酸、酒石酸鈉、酒石酸中的一種或任意幾種的組合；和/或

其中，所述螯合劑為EDTA(乙二胺四乙酸)、NTA(次氮基三乙酸)、水楊酸、三草酸、二亞乙基三胺五乙酸、檸檬酸、N,N'-乙二胺二琥珀酸、鄰菲咯啉、酒石酸鉀鈉、檸檬酸銨、酒石酸、酒石酸鈉、三乙醇胺中的一種或任意幾種的組合；和/或

其中，所述鹽離子為氯化鈉、氯化銨、硫酸鈉、硫酸銨、氯化鉀、碳酸鉀、磷酸銨、氯化鋰、乙酸鈉、碳酸鋰、高氯酸鈉、碘化鈉中的一種或任意幾種的組合；和/或

其中，所述抗微生物劑為抗生素、抗病毒劑、抗真菌劑、抑菌劑或抗寄生蟲劑中的一種或任意幾種的組合；和/或

其中，所述核酸保護劑為氧釩核糖核苷復合物、尿素、兒茶素、茶黃素、花青素、花白素、類黃酮、木酚素、N-乙酰氨基己糖、己糖醛酸中的一種或任意幾種的組合。

4.如權利要求3所述的所述樣本保存液，其中，

所述細胞裂解液為質量體積百分比5-30％的鹽酸胍、10-30％的異硫氰酸胍、5-20％的碘化鈉、2-30％的高氯酸鈉、5-40％的尿素、0.2-10％的Brij 56、0.2-5％的十二烷基硫酸鈉、0.2-2％的辛烷基聚氧乙烯基十二烷基氯化銨、0.2-2％的十四烷基三甲基氯化銨、0.2-1％的十二烷基肌氨酸鈉中的一種或任意幾種的組合；

和/或

所述緩沖劑為10-400mM的檸檬酸、20-200mM的N,N-二羥乙基甘氨酸、20-200mM酒石酸鈉、20-100mM酒石酸中的一種或任意幾種的組合；

和/或

所述螯合劑為1-80mM的EDTA、2-50mM檸檬酸、2.5-125mM的檸檬酸鈉、2-100mM酒石酸、10-100mM的酒石酸鈉中的一種或任意幾種的組合；

和/或

所述鹽離子為50-500mM的氯化鈉、50-500mM的氯化鉀、50-500mM的乙酸鈉、100-800mM高氯酸鈉、100-1000mM的碘化鈉；

和/或

所述的抗微生物劑為質量體積百分比0.1-1％的三氯生、0.05-1％的IRGASAN DP 300、0.05-1％的Proclin 950、0.05-0.5％的Proclin 300、0.05-0.5％的Proclin 150、0.05-2％的疊代鈉、1-20％的乙醇、2-10％的異丙醇、2-20％聚乙二醇200、2-10％的甘油中的一種或任意幾種的組合；

和/或

所述核酸保護劑為質量體積百分比2-5％的尿素、質量體積百分比0.05-2.5％的兒茶素、0.05-2％的花青素、0.1-2％的木酚素、1-5％的N-乙酰氨基己糖中的一種或任意幾種的組合；

和/或

所述的唾液樣本和樣本保存液的體積為1:10-10:1，優選為1:4-4:1，更優選為1:2-2:1，例如1:1。。