[發明專利]一種用于檢測II型草魚呼腸孤病毒的RT-RPA引物、探針、試劑盒及檢測方法有效
| 申請號： | 202011577941.3 | 申請日： | 2020-12-28 |
| 公開（公告）號： | CN112680544B | 公開（公告）日： | 2021-11-26 |
| 發明（設計）人： | 李瑩瑩;王慶;曾偉偉;王英英;尹紀元;吳斯宇;石存斌 | 申請（專利權）人： | 中國水產科學研究院珠江水產研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205 | 代理人： | 胡輝 |
| 地址： | 510380 廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 檢測 ii 草魚 呼腸孤 病毒 rt rpa 引物 探針 試劑盒 方法 | ||
1.一種試劑盒，所述試劑盒用于檢測基因II型草魚呼腸孤病毒，所述試劑盒包含引物和探針；
所述引物包含上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列為：
3F：5’-CCCAAAATCTAAGTAAGCTCTTCCAATC-3’；
所述下游引物的核苷酸序列為：
3R：5’-CATCACAAGCGAAAAATTTCTTTGGGACAC-3’；
所述探針的序列為：
5'-CCGTCCGTATATCTTCAGACCAACCCTTTA-FAM-dT-THF-C-BHQ-dT-CGCCATCCTCTGCCC-C3-spacer-3'。
2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包含緩沖液，醋酸鎂溶液，以及酶混合物。
3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包含陽性對照。
4.權利要求1～3任一項所述試劑盒在非診斷目的檢測II型草魚呼腸孤病毒中的應用。
5.一種非診斷目的檢測II型草魚呼腸孤病毒的方法，包含以下步驟：
S1：提取待測樣品的RNA；
S2：以步驟S1的RNA為模板，采用權利要求1～3任一項所述試劑盒進行RT-RPA擴增反應；
S3：對RT-RPA擴增產物進行熒光檢測判定檢測結果。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟S3所述判定的具體標準為：若檢測到熒光，則樣品中含有Ⅱ型草魚呼腸孤病毒，若未檢測到熒光，則不含有Ⅱ型草魚呼腸孤病毒。
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