[發(fā)明專利]一種抗病毒藥物臨床研究血漿樣本中奧司他韋及代謝物奧司他韋酸濃度的生物分析方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011568607.1
• 申請日: 2020-12-25
• 公開（公告）號: CN112730682B
• 公開（公告）日: 2022-06-17
• 發(fā)明（設計）人: 楊勇;陳濤;張先鋒;蘇彩娟;周林芳;劉旭凌;鐘勘;姜金方;周茂金
• 申請（專利權）人: 蘇州海科醫(yī)藥技術有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京同輝知識產權代理事務所(普通合伙) 11357
• 代理人: 劉洪勛

1.一種抗病毒藥物臨床研究血漿樣本中奧司他韋及代謝物奧司他韋酸濃度的生物分析方法，其特征在于，包括以下步驟：

預處理，在96孔板中加入血漿，加入內標溶液，加入乙腈:甲醇的體積比1:2，v/v，渦流及離心后取上清液到另一干凈96孔板中，加入超純水，渦流混勻，進樣5.00μL；

色譜，將待測樣品液相色譜分離，采用Luna PFP色譜柱，梯度洗脫，流動相A為含0.3％甲酸和2mM醋酸銨的水溶液，流動相B為甲醇和乙腈的混合溶液，色譜運行時間3min；

梯度洗脫條件：

0.50min：流速：0.5000mL/min；流動相B：20％；

1.20min：流速：0.5000mL/min；流動相B：40％；

1.50min：流速：0.5000mL/min；流動相B：40％；

1.80min：流速：0.5000mL/min；流動相B：80％；

2.30min：流速：0.5000mL/min；流動相B：80％；

2.31min：流速：0.5000mL/min；流動相B：20％；

3.00min：停止；

其中，進樣量5.00μL；自動進樣器溫度：4℃；柱溫：40℃；

質譜，采用電噴霧離子源，正離子檢測，噴射電壓5500V，氣體1(Gas1)60psi，氣體2(Gas2)70psi，氣簾氣體(Curtain Gas)40psi，離子源溫度550℃，碰撞誘導解離10psi，駐留時間100ms，奧司他韋定量分析離子對m/z 313.2→208.2，碰撞能量(CE)19eV，去簇電壓(DP)50V，奧司他韋酸定量分析離子對285.1→138.2，碰撞能量(CE)27eV，去簇電壓(DP)40V，奧司他韋-d5定量分析離子對318.2→213.2，碰撞能量(CE)19eV，去簇電壓(DP)50V，奧司他韋酸-d3定量分析離子對288.1→138.1，碰撞能量(CE)27eV，去簇電壓(DP)70V。

2.根據權利要求1所述的一種抗病毒藥物臨床研究血漿樣本中奧司他韋及代謝物奧司他韋酸濃度的生物分析方法，其特征在于：所述預處理，取50.0μL血漿樣品，加入50.0μL內標溶液，加入150μL乙腈:甲醇的體積比1:2，v/v，渦流及離心后取50.0μL上清液到另一干凈96孔板中，加入150μL超純水，渦流混勻。

3.根據權利要求1或2所述的一種抗病毒藥物臨床研究血漿樣本中奧司他韋及代謝物奧司他韋酸濃度的生物分析方法，其特征在于：所述內標溶液為奧司他韋-d5和奧司他韋酸-d3溶液。