[發明專利]腫瘤干細胞標志分子EpCAM的親和力成熟結合蛋白及應用

有效

• 申請號: 202011566099.3
• 申請日: 2020-12-25
• 公開（公告）號: CN112538118B
• 公開（公告）日: 2022-06-24
• 發明（設計）人: 魏星;戴琳
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: C07K16/30
• 分類號: C07K16/30;C12N15/13;A61K39/395;A61P35/00
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞

本發明公開一種腫瘤干細胞標志分子EpCAM的親和力成熟結合蛋白及應用。該親和力成熟結合蛋白是氨基酸序列如SEQ IDNO:3所示的aEP18E7結合蛋白；或是氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的aEP14E3結合蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的aEP17D8結合蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的aEP20C10結合蛋白和氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示的aEP24D10結合蛋白中的至少一種與氨基酸序列如SEQ IDNO:3所示的aEP18E7結合蛋白組合形成的結合蛋白；其活性高，能在制備用于治療EpCAM高表達為特征疾病的藥物中進行應用。

技術領域

本發明屬于親和力成熟結合蛋白領域，特別涉及一種腫瘤干細胞標志分子EpCAM的親和力成熟結合蛋白及應用。

背景技術

研究表明，腫瘤細胞之間存在異質性，在腫瘤實體中腫瘤細胞可形成一個層次結構，該層次結構中有一群具有起始腫瘤能力的細胞，即為腫瘤干細胞。腫瘤干細胞理論認為腫瘤干細胞與普通腫瘤細胞類似，具有自我更新、無限增殖、多能性和耐藥性等特點。目前治療腫瘤的主要途徑包括手術切除，放療或者化療，但這些方法均不能有效的殺死腫瘤干細胞。由于腫瘤干細胞具有起始腫瘤能力，利用基因工程技術，設計靶向腫瘤干細胞特異性生物標記分子，成為治療癌癥的另一個有效途徑。

上皮細胞黏附分子(EpCAM)由314個氨基酸組成，包含三個結構域：胞外段結構域(EpEX)，單次跨膜結構域和胞內結構域(EpICD)。在一些正常組織和細胞中，如食道鱗狀上皮，EpCAM蛋白表達水平較低，而在某些具有增殖能力的細胞中，如肝再生細胞，EpCAM的表達水平相對較高，在正常的胃粘膜中無EpCAM表達，但是在77％的胃癌患者胃粘膜中均發現EpCAM重新表達。另外，還有相當一部分組織在發生癌變時出現了EpCAM表達水平較正常組織高的情況，如胰腺、乳腺、卵巢、結腸、膀胱和前列腺等。這些研究表明，EpCAM可能在組織細胞惡性轉化過程中發揮著一定的作用，且可能參與腫瘤發生發展相關的代謝過程。此外，還有研究表明，EpCAM蛋白胞外段缺失在腫瘤中經常發生，而這種情況與腫瘤的惡性程度相關。EpCAM蛋白參與腫瘤細胞增殖、形成、侵襲、遷移、診斷、藥物抵抗和抗腫瘤治療等過程，因此，以EpCAM作為腫瘤治療的靶點，擁有廣闊的應用前景，具有極高的醫學價值。

發明內容

本發明的首要目的在于克服現有技術的缺點與不足，提供一種腫瘤干細胞標志分子EpCAM的親和力成熟結合蛋白。

本發明的另一目的在于提供上述腫瘤干細胞標志分子EpCAM的親和力成熟結合蛋白的應用。

本發明的目的通過下述技術方案實現：一種腫瘤干細胞標志分子EpCAM的親和力成熟結合蛋白，是aEP18E7親和力成熟結合蛋白；或是aEP14E3親和力成熟結合蛋白、aEP17D8親和力成熟結合蛋白、aEP20C10親和力成熟結合蛋白和aEP24D10親和力成熟結合蛋白中的至少一種與aEP18E7親和力成熟結合蛋白組合形成的結合蛋白；

所述的aEP14E3親和力成熟結合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；

所述的aEP17D8親和力成熟結合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；

所述的aEP18E7親和力成熟結合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；

所述的aEP20C10親和力成熟結合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示；

所述的aEP24D10親和力成熟結合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。