[發明專利]一種聚多巴胺聚乙烯亞胺納米顆粒、其制備和應用

有效

• 申請號: 202011558575.7
• 申請日: 2020-12-25
• 公開（公告）號: CN112679741B
• 公開（公告）日: 2022-08-16
• 發明（設計）人: 陳君毅;檀宸;雷苑;孫興懷;王幽香;賈凡;張鵬;陳雪莉;喬云圣
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬眼耳鼻喉科醫院
• 主分類號: C08G81/00
• 分類號: C08G81/00;A61K48/00;A61P25/00;A61P25/28;A61P27/02;A61P27/06;A61P29/00;B82Y5/00;B82Y40/00
• 代理公司: 北京市盈科律師事務所 11344
• 代理人: 閆東偉

本發明公開一種聚多巴胺聚乙烯亞胺納米顆粒(PDA/PEI NPs)其制備及應用。本發明公開的聚多巴胺聚乙烯亞胺納米顆?？捎糜谪撦d核酸(DNA、siRNA、microRNA以及shRNA等)。本發明還公開一種聚多巴胺聚乙烯亞胺納米顆粒(PDA/PEI NPs/NA)其制備及應用。

技術領域

本發明涉及的是一種藥物技術領域的藥物輸送技術，更具體涉及一種聚多巴胺聚乙烯亞胺納米顆粒、其制備和應用。

背景技術

青光眼是世界上不可逆性失明的首要原因。眼壓(IOP)的管理是限制青光眼進展的最有效方法。目前，青光眼的治療策略是恢復房水(AH)產生和引流之間的平衡。在原發性開角型青光眼(POAG)中，傳統流出途徑是AH引流的主要阻力部位。然而，現有技術中僅設計了幾種抗青光眼藥物來靶向常規的流出途徑。

隨著技術的進步，通過外源性基因導入來治療疾病的成為可能。病毒載體往往具有較高的基因轉移能力，但可能受到其內在免疫原性相關并發癥的阻礙?；騻鬟f的非病毒方法，包括聚合物、脂基和無機納米顆粒以及物理傳遞技術，也得到了廣泛的研究。

眼基因治療已進入高速發展時代，然而，除非核酸(NA，nucleic acid)與其他化學分子復合或采用物理方法迫使其進入細胞并導入核，否則裸露核酸分子的誘導細胞的能力通常是無效的。盡管病毒載體目前是替換和/或校正基因的最佳選擇，目前在治療眼底遺傳性疾病中已有較多研究，但將仍有待改進，以提高轉導效率并降低醫源性風險。病毒載體相比非病毒載體(裸質粒DNA、寡核苷酸和RNA)具有更好的安全性(免疫原性低、插入突變的風險低)、更大的載藥能力、重復給藥的潛力，且更容易大規模生產。

目前已有的核酸的載體或轉染方法有病毒類載體、其他非病毒載體(如脂質體、陽離子聚合物)、脂質體；局部電穿孔轉染。其中，病毒載體作為基因傳遞的工具被廣泛地采納，但仍存在著局限性，即病毒性載體均可誘導機體產生某種程度的免疫反應，存在著插入突變等致瘤及致毒的風險。非病毒類載體：基因轉移和表達效率較低，靶向性也較低，導入基因表達效果短暫，療效也降低。電穿孔特性受到多種因素的影響，如電壓、電穿孔次數和時間、溫度、DNA的狀態和濃度等，參數設定不佳將對組織產生一定的損害。電穿孔引起的不良反應主要是局部細胞損害和炎性反應。電壓過高，會造成細胞的死亡或組織失去功能，電穿孔次數過多會對局部細胞組織造成不可逆的損害。

microRNA(miRNA)是復雜生物學過程中的重要調節一環，miR-21-5p有改變傳統流出途徑阻力的功能。但作為核酸，其轉入離體眼部細胞與在體眼內的研究與未來臨床轉化，也面臨著轉染這個重要問題。

由于眼部與全身免疫系統有屏障隔離，并且眼部血流與代謝保持一個較高的水平，眼內藥物擴散方式更加復雜，有著更多的未知性；除此之外，眼睛是全身最精細的結構之一，一旦受損，易引起不可逆性盲，將極大的影響患者生活質量。因此基因治療的載體選擇需要更加謹慎。因此有必要開發更加安全而有效的核酸藥物眼部遞送系統。

發明內容

本發明提供了一種能夠在眼內轉染治療中應用的高分子多聚物納米顆粒，該高分子多聚物納米顆粒能夠長時間穩定的分散在溶液里，不需要借助表面承載，儲存方便，該高分子多聚物納米顆粒能夠簡便有效的負載核酸，所得到的聚多巴胺聚乙烯亞胺納米顆粒核酸復合物可以在4℃較長穩定保存，有效的遞送到眼部，實現細胞靶向的緩控釋給藥，并且該遞送系統幾乎沒有免疫反應。

更具體的，本發明要解決的第一個技術問題是：提供一種聚多巴胺聚乙烯亞胺納米顆粒(PDA/PEI NPs)的制備方法。

為解決上述技術問題，本發明的提供的技術方案是：一種聚多巴胺聚乙烯亞胺納米顆粒的制備方法，包括以下步驟：

(1)聚多巴胺(PDA)溶液的制備：將多巴胺溶于水中，加熱；加入堿的水溶液，發生自聚合反應形成聚多巴胺溶液；