[發明專利]一種淋巴細胞及其培養體系和培養方法在審
| 申請號： | 202011552820.3 | 申請日： | 2020-12-24 |
| 公開（公告）號： | CN112608903A | 公開（公告）日： | 2021-04-06 |
| 發明（設計）人： | 王冶陶;彭昉;俞英豪 | 申請（專利權）人： | 杭州中贏生物醫療科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/10 | 分類號： | C12N5/10;C12N5/0783;A61K35/17;A61P31/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京集佳知識產權代理有限公司 11227 | 代理人： | 潘穎 |
| 地址： | 310052 浙江省杭州市*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 淋巴細胞 及其 培養 體系 方法 | ||
1.一種淋巴細胞的培養體系，其特征在于，所述培養體系包括滅活的基因工程細胞、IL-2、FBS、抗CD3抗體和淋巴細胞基礎培養基；
所述基因工程細胞為表達IL-21、IL-12、CD80和CD206的細胞。
2.根據權利要求1所述的培養體系，其特征在于，所述培養體系中各組分用量為：
3.根據權利要求1所述的培養體系，其特征在于，所述IL-21為跨膜IL-21；所述IL-12由IL-12A和IL-12B組成，所述IL-12B為跨膜IL-12B。
4.根據權利要求1至3中任一項所述的培養體系，其特征在于，所述基因工程細胞的宿主細胞為K562細胞；所述抗CD3抗體為OKT3；所述淋巴細胞基礎培養基為RPMI 1640。
5.權利要求1至4中任一項所述培養體系的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
構建表達IL-21、IL-12、CD80和CD206的細胞，經滅活，得到滅活的基因工程細胞；
將滅活的基因工程細胞、IL-2、FBS、抗CD3抗體加入淋巴細胞基礎培養基。
6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述滅活的方式為輻照滅活，所述輻照的劑量為100～500Gy，時間為10～60min。
7.一種淋巴細胞的培養方法，其特征在于，包括如下步驟：
將單核細胞加入權利要求1至4中任一項所述培養體系，培養5～10天，離心；
在細胞中再次補加培養體系，再培養5～10天，離心。
8.根據權利要求7所述的培養方法，其特征在于，所述培養的條件為37℃、5％CO2；
所述培養體系中的基因工程細胞與所述單核細胞的比例為1:(0.25～5)。
9.權利要求7或8所述培養方法獲得的淋巴細胞。
10.權利要求9所述淋巴細胞在制備治療腫瘤性疾病和/或傳染性疾病的藥物中的應用。
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