[發(fā)明專利]一種馬鈴薯蛋白水解物，制備及在貼壁細胞培養(yǎng)中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011539958.X
• 申請日: 2020-12-23
• 公開（公告）號: CN112851753B
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 丁功濤;擺倩文;馬忠仁
• 申請（專利權(quán)）人: 西北民族大學(xué)
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K7/08;C07K14/415;C07K1/14;C07K1/34;C12P21/06;C12N5/071
• 代理公司: 上海微策知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31333
• 代理人: 李萍

1.一種馬鈴薯蛋白水解物，其特征在于，其包含復(fù)合活性多肽和氨基酸；所述氨基酸的含量至少為25wt%；

所述馬鈴薯蛋白水解物的制備方法，其包括如下步驟：

（1）底物配制：取馬鈴薯蛋白粉置于反應(yīng)釜中，加入純水?dāng)嚢枞芙獾玫今R鈴薯蛋白粉溶液；

（2）酶解：在上述馬鈴薯蛋白粉中加入風(fēng)味蛋白酶，攪拌混勻之后加入0.1M/L?HCl調(diào)節(jié)pH至5.5~7.5，設(shè)置溫度至40~60攝氏度，酶解反應(yīng)3~8小時；

（3）滅活：對上述酶解后的體系升溫至至少95攝氏度以上，處理至少15min，然后冷卻至室溫收集粗制水解液；

（4）后處理：對所述粗制水解液進行離心收集上層清液，并通過5kD截留分子量超濾膜超濾，收集小于5kD分子量的水解液，得到精制水解液，干燥，即得；

所述蛋白酶與馬鈴薯蛋白粉的比例為（5000~35000）U：1g；

所述酶解反應(yīng)中攪拌速度為300~900rpm/min。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的馬鈴薯蛋白水解物，其特征在于，所述復(fù)合活性多肽至少包含如下氨基酸序列的多肽：

SEQ?ID?No?1：GQLIVVPQNF

SEQ?ID?No?2：QLIVVPQNF

SEQ?ID?No?3：IDPGDSDIIK

SEQ?ID?No?4：GGGGGYGGGGGYGGGGGGGYGGGR

SEQ?ID?No?5：VPTVDVSVVDL

SEQ?ID?No?6：NPEEIPWG

SEQ?ID?No?7：APGKPPVDY

SEQ?ID?No?8：APIDVVVPPGNTGLDPS。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的馬鈴薯蛋白水解物，其特征在于，所述復(fù)合活性多肽還包含如下氨基酸序列的多肽：

SEQ?ID?No?9：PPVLPPQE

SEQ?ID?No?10：VPELGPDVNF

SEQ?ID?No?11：GEGTNTWDRFE。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的馬鈴薯蛋白水解物，其特征在于，所述氨基酸至少包含氨基酸組合；所述氨基酸組合由絲氨酸、谷氨酸、纈氨酸、亮氨酸、酪氨酸、氨基丁酸、組氨酸、脯氨酸、谷氨酰胺組成；所述氨基酸組合的含量至少占所述馬鈴薯蛋白水解物質(zhì)量的18wt%。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的馬鈴薯蛋白水解物的制備方法，其特征在于，所述馬鈴薯蛋白粉溶液的濃度為5~12wt%。

6.一種根據(jù)權(quán)利要求1~4任一項所述的馬鈴薯蛋白水解物的應(yīng)用，其特征在于，應(yīng)用于MDCK貼壁細胞培養(yǎng)領(lǐng)域。

7.一種細胞培養(yǎng)基，其特征在于，其包含根據(jù)權(quán)利要求1~4任一項所述的馬鈴薯蛋白水解物；所述馬鈴薯蛋白水解物的含量為0.3~0.7g/L。