[發明專利]非洲豬瘟病毒P12蛋白納米顆粒及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 202011533399.1
• 申請日: 2020-12-23
• 公開（公告）號: CN112574319B
• 公開（公告）日: 2023-04-18
• 發明（設計）人: 林堅;朱新杰;李紫晨;鄭夢竹;沈顯貴
• 申請（專利權）人: 非零和（北京）投資管理有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12P21/00;A61K47/69;A61K39/12;A61P31/20
• 代理公司: 北京辰權知識產權代理有限公司 11619
• 代理人: 金銘

1.一種非洲豬瘟病毒P12蛋白納米顆粒，其特征在于，所述蛋白納米顆粒由蛋白質單體自組裝形成，所述蛋白質單體為從氨基端至羧基端依次包含金屬硫蛋白、谷胱甘肽硫轉移酶和P12蛋白的融合蛋白；所述金屬硫蛋白為MT3，所述谷胱甘肽硫轉移酶為GSTP1；所述金屬硫蛋白的氨基酸序列為SEQIDNO：1所示；所述谷胱甘肽硫轉移酶的氨基酸序列為SEQIDNO：2所示；所述P12蛋白的氨基酸序列為SEQIDNO：3所示；

所述蛋白納米顆粒由所述蛋白質單體經金屬離子誘導而自組裝形成，所述金屬離子為Fe²⁺。

2.如權利要求1所述的蛋白納米顆粒，其特征在于，所述金屬硫蛋白和谷胱甘肽硫轉移酶之間還包括第一連接肽。

3.如權利要求2所述的蛋白納米顆粒，其特征在于，所述谷胱甘肽硫轉移酶和所述P12蛋白之間，還包括第二連接肽。

4.如權利要求3所述的蛋白納米顆粒，其特征在于，所述第一連接肽和所述第二連接肽各自獨立地選自剛性連接肽或柔性連接肽。

5.如權利要求1所述的蛋白納米顆粒，其特征在于，所述蛋白質單體進一步包含信號肽和/或蛋白標簽。

6.一種生物材料，其特征在于，所述生物材料為：

（i）編碼權利要求1-5中任一項中所述的蛋白質單體的核酸；

（ii）包含（i）所述核酸的載體；或

（iii）包含（i）所述核酸和/或（ii）所述載體的宿主細胞。

7.如權利要求6所述的生物材料，其特征在于，所述核酸為SEQIDNO：5的第13-987位，或者SEQIDNO：5的第13-1005位。

8.權利要求1-5中任一項所述的蛋白納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括：在允許所述蛋白質單體表達的條件下，培養權利要求6中所述的宿主細胞；在所述培養過程加入金屬離子進行誘導；和對培養得到的宿主細胞培養物進行蛋白純化，即制備得到所述蛋白質單體經自組裝形成的蛋白納米顆粒。

9.如權利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述金屬離子為Fe²⁺，所述金屬離子的濃度為0.01-0.5mM。

10.如權利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述培養的過程中，所用培養基的pH為6.5-8.0。

11.一種免疫原性組合物或疫苗，其特征在于，其包括權利要求1-5中任一項所述的蛋白納米顆粒。

12.如權利要求11所述的免疫原性組合物或疫苗，其特征在于，所述免疫原性組合物或疫苗的活性成分為權利要求1-5中任一項所述的蛋白納米顆粒。

13.如權利要求11所述的免疫原性組合物或疫苗，其特征在于，所述免疫原性組合物或疫苗還包含佐劑、藥學上可接受的載體、藥學上可接受的賦形劑中的一種或兩種以上。

14.權利要求1-5中任一項所述的蛋白納米顆粒、權利要求6-7中任一項所述的生物材料、或權利要求11-13中任一項所述的免疫原性組合物或疫苗在制備用于在受試者中誘導針對非洲豬瘟病毒的特異性免疫應答和/或用于在受試者中預防和/或治療非洲豬瘟病毒的產品中的應用。

15.如權利要求14所述的應用，其特征在于，所述產品為疫苗。

16.如權利要求14所述的應用，其特征在于，所述特異性免疫應答包括抗體應答。

17.如權利要求14所述的應用，其特征在于，所述受試者是哺乳動物。