[發明專利]一種尿多酸肽注射液中小分子多肽的分子量及分子量分布的檢測方法

有效

• 申請號: 202011528064.0
• 申請日: 2020-12-22
• 公開（公告）號: CN112505226B
• 公開（公告）日: 2022-11-11
• 發明（設計）人: 王金煥;朱峰妍;王華娟;辛妮
• 申請（專利權）人: 南京海納醫藥科技股份有限公司;南京海納制藥有限公司;南京一諾醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 南京思拓知識產權代理事務所(普通合伙) 32288
• 代理人: 呂鵬濤

1.一種尿多酸肽注射液中小分子多肽的分子量及分子量分布的檢測方法，其特征在于，分別以細胞色素C、胰島素、胸腺五肽和還原型谷胱甘肽作為對照品配制四種對照品溶液，采用高效液相色譜法和示差檢測器進行檢測，以對照品保留時間為橫坐標，分子量的log值為縱坐標，通過GPC軟件計算回歸方程，再將尿多酸肽注射液配置成供試品溶液，按照相同的色譜條件進行測定，由GPC軟件分析尿多酸肽注射液中小分子多肽的分子量及分子量分布，其色譜條件包括：以親水性球型高聚物為填充劑，色譜柱為Sepax Zenix SEC-100，長度為300mm，直徑為7.8mm，填料粒徑為3μm；以乙腈、水和三氟乙酸的混合溶液作為混合流動相進行等度洗脫，其中，乙腈、水和三氟乙酸的體積比為57: 43: 0.2；所述細胞色素C的重均分子量為12384；所述胰島素的重均分子量為5777；所述胸腺五肽的重均分子量為679；所述還原型谷胱甘肽的重均分子量為307；所述小分子多肽的分子量在5000D以下；

所述四種對照品溶液的配制方法如下：將細胞色素C、胰島素、胸腺五肽和還原型谷胱甘肽分別溶于所述混合流動相中，并稀釋制成濃度分別為5mg/ml的溶液，作為四種對照品溶液；所述供試品溶液的配制方法如下：取尿多酸肽注射液43ml，依次加57ml乙腈和0.2ml三氟乙酸，混勻，作為供試品溶液。

2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述色譜條件包括：柱溫為35~45℃。

3.根據權利要求2所述的檢測方法，其特征在于，所述色譜條件包括：柱溫為40℃。

4.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述色譜條件包括：流速為0.3~0.7ml/min。

5.根據權利要求4所述的檢測方法，其特征在于，所述色譜條件包括：流速為0.5ml/min。

6.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述色譜條件包括：進樣量為5~20μl。

7.根據權利要求6所述的檢測方法，其特征在于，所述色譜條件包括：進樣量為10μl。