[發明專利]一種靶向MUC1的CAR-T細胞及其應用

有效

• 申請號: 202011521236.1
• 申請日: 2020-12-21
• 公開（公告）號: CN112522207B
• 公開（公告）日: 2023-04-14
• 發明（設計）人: 湯朝陽;請求不公布姓名;秦樂;吳迪;馮世忠;馮嘉昆;楊樂旋
• 申請（專利權）人: 湯朝陽
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C07K19/00;C12N15/62;C12N15/867;A61K39/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種靶向MUC1的CAR-T細胞，其特征在于，所述CAR-T細胞表達特異性結合MUC1抗原的嵌合抗原受體和復合型IL-6；

所述嵌合抗原受體包括抗原結合結構域、鉸鏈區、跨膜結構域和信號轉導結構域；

所述抗原結合結構域為抗MUC1單鏈抗體；

所述鉸鏈區為IgG4-CH3；

所述復合型IL-6為NFAT調控型過表達；

所述嵌合抗原受體由CD8α信號肽、MUC1抗原結合結構域、IgG4-CH3、CD8α跨膜結構域、4-1BB和CD3ζ串聯組成；

所述嵌合抗原受體的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:?2所示；

所述復合型IL-6為IL-6和IL-6?Rα的復合物，所述復合型IL-6的氨基酸序列如SEQ?IDNO:?3所示。

2.一種表達載體，其特征在于，所述表達載體包括嵌合抗原受體編碼基因、NFAT調控啟動子和復合型IL-6編碼基因；

所述嵌合抗原受體編碼基因的核酸序列如SEQ?ID?NO:?4所示；

所述NFAT調控啟動子的核酸序列如SEQ?ID?NO:?5所示；

所述復合型IL-6編碼基因的核酸序列如SEQ?ID?NO:?6所示。

3.根據權利要求2所述的表達載體，其特征在于，所述表達載體包括病毒載體；

所述病毒載體包括慢病毒載體、逆轉錄病毒載體或腺相關病毒載體中的任意一種。

4.根據權利要求3所述的表達載體，其特征在于，所述表達載體為慢病毒載體。

5.一種重組慢病毒，其特征在于，所述重組慢病毒采用權利要求2-4任一項所述的表達載體與包裝輔助質粒共轉染哺乳細胞制備得到。

6.一種權利要求1所述的CAR-T細胞的制備方法，其特征在于，所述方法包括將權利要求2-4任一項所述的表達載體或權利要求5所述的重組慢病毒導入T細胞的步驟。

7.一種藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物包括權利要求1所述的CAR-T細胞。

8.根據權利要求7所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物還包括藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑中的任意一種或至少兩種的組合。

9.權利要求1所述的CAR-T細胞、權利要求2-4任一項所述的表達載體、權利要求5所述的重組慢病毒或權利要求7或8所述的藥物組合物在制備腫瘤治療藥物中的應用。