[發(fā)明專利]一種黑木耳黑色素及其制備與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011509205.4
• 申請(qǐng)日: 2020-12-18
• 公開（公告）號(hào): CN112592605B
• 公開（公告）日: 2022-09-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張擁軍;樊任輝;湯雨萱;黃凌特;陳雅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)計(jì)量大學(xué)
• 主分類號(hào): C09B61/00
• 分類號(hào): C09B61/00;C09B67/54;A61P39/06
• 代理公司: 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;李世玉

本發(fā)明公開了一種黑木耳黑色素及其制備與應(yīng)用，將黑木耳粉中加入去離子水、堿性蛋白酶，超聲提取，離心，獲得上清液和沉淀；上清液濃縮至原體積的1/3，獲得上清液濃縮液；沉淀加入浸提劑，超聲提取，離心，取上清液與上清液濃縮液合并后冷凍干燥，獲得黑木耳黑色素；黑木耳黑色素的提取得率可達(dá)12.09％，對(duì)ABTS⁺清除率91.47％，超氧陰離子自由基清除率87.12％，過氧化氫清除率91.83％，線蟲半數(shù)致死天數(shù)11.3d，SOD活力與CAT活力分別達(dá)36.2U/mg與45.1U/mg。

(一)技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種黑木耳黑色素及其制備與應(yīng)用。

(二)背景技術(shù)

黑木耳(Auricularia auricula)為我國(guó)珍貴的藥用和食用菌，已有超過1000年的食用歷史。木耳子實(shí)體呈現(xiàn)黑褐色是因其富含的黑色素，其黑色素安全性極高，且具有抗病毒、抗衰老、防治紫外線輻射和增強(qiáng)人體免疫力等保健功能，尤其具有強(qiáng)自由基清除能力，是極具發(fā)展?jié)摿Φ奶烊还δ苄灾珓卺t(yī)藥、化妝品、食品、精細(xì)化工等領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用前景。

黑木耳黑色素的制備大多是利用其在堿性溶液溶解，而在酸性溶液中沉淀的性質(zhì)進(jìn)行提取。為增加黑色素的溶出效果，大部分溶劑提取法還會(huì)輔助超聲或微波技術(shù)，利用超聲波的空化效應(yīng)、機(jī)械效應(yīng)及熱效應(yīng)，或者微波的熱效應(yīng)加速黑色素的溶出。另外，由于纖維素酶可有效破壞細(xì)胞壁，提高活性物質(zhì)的提取效率，已在食藥用菌活性物質(zhì)提取中得到廣泛應(yīng)用。木耳子實(shí)體中黑色素的提取方法見下表1。由表1，常規(guī)的堿法提取與酸法提取，操作簡(jiǎn)便，但黑木耳黑色素的得率不高(在3％以下)。在常規(guī)提取基礎(chǔ)上，輔助超聲、微波等機(jī)械手段或機(jī)械手段與生物酶法協(xié)同處理，可使黑木耳黑色素的提取得率明顯提高。

表1木耳子實(shí)體中黑色素的提取方法

傳統(tǒng)的提取技術(shù)具有能耗高、污染環(huán)境和提取率低的特點(diǎn)。隨著各國(guó)對(duì)環(huán)境問題的重視和人們對(duì)“綠色”、“天然”產(chǎn)品需求的不斷增加，天然產(chǎn)物高效綠色提取技術(shù)越來越受到研究者的重視。絕大多數(shù)的提取技術(shù)都須要使用溶劑作為媒介，溶劑及其相關(guān)提取技術(shù)的選擇很大程度上決定了提取過程的能耗和提取產(chǎn)品的質(zhì)量，因此提取方法的“綠色”主要體現(xiàn)在“溶劑”上。在這樣的背景下，各種新型溶劑如離子液體(Ionic Liquids)相繼出現(xiàn)。離子液體，也稱為低溫熔融鹽，是由陰陽(yáng)離子所組成的鹽，在室溫或接近室溫下會(huì)呈現(xiàn)液態(tài)。離子液體的熔點(diǎn)通常比較低，它一般由有機(jī)陽(yáng)離子和無機(jī)陰離子組成，常見的陽(yáng)離子有季銨鹽離子、季磷鹽離子和吡咯鹽離子等，陰離子有鹵素離子、六氟磷酸根離子等。離子液體擁有獨(dú)特的理化性質(zhì)：(1)極性較強(qiáng)，能夠更好地溶解無機(jī)物、有機(jī)物和高聚物；(2)黏度比較高，比一般有機(jī)溶劑高1-2個(gè)數(shù)量級(jí)；(3)不揮發(fā)、不易燃易爆、不易氧化、熱穩(wěn)定性好。離子液體也曾經(jīng)一度被認(rèn)為是傳統(tǒng)有機(jī)溶劑的良好替代品，但隨著研究的不斷深入，人們逐漸發(fā)現(xiàn)該類溶劑在提取過程中也存在一些無法協(xié)調(diào)的矛盾。如離子液體普遍粘度較大，這給離子液體回收以及產(chǎn)物分離純化帶來了困難，且制備成本高，分離純化困難；部分離子液體更是不可再生、難降解、毒性顯著等。這些直接導(dǎo)致了離子液體至今未在天然產(chǎn)物提取領(lǐng)域?qū)崿F(xiàn)工業(yè)化應(yīng)用，所以進(jìn)一步尋找新型綠色反應(yīng)溶劑已迫在眉睫。

深共晶溶劑是由Abbott等人在2003年首次提出，他們通過氯化膽堿與尿素以摩爾比2:1合形成了一種混合物，其熔點(diǎn)低于兩組分的熔點(diǎn)，該溶劑制備成本低、無毒、可生物降解。作為新型的綠色溶劑，深共晶溶劑具有蒸汽壓低、毒性小、電化學(xué)穩(wěn)定和可生物降解等獨(dú)特的理化性質(zhì)。其結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和離子液體類似，有著與一般有機(jī)溶劑不同的性質(zhì)和行為，如穩(wěn)定性高、電化學(xué)窗口寬、熔點(diǎn)低，對(duì)各種有機(jī)物和無機(jī)物溶解能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，被稱為綠色、新穎的溶劑介質(zhì)。除此之外，深共晶溶劑還有著離子液體所沒有的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)，如原料廉價(jià)易得，制備過程不使用溶劑，過程簡(jiǎn)單、無需純化，利用率100％；可生物降解，對(duì)環(huán)境友好等。因此，作為可替代離子液體和傳統(tǒng)有機(jī)溶劑的“綠色溶劑”，近幾年來對(duì)深共晶溶劑的研究受到了世界各國(guó)生物、化學(xué)領(lǐng)域工作者的廣泛關(guān)注，但在黑色素的提取制備方面的研究尚未見有報(bào)道。