[發明專利]一種穩定的肌酸激酶MB同工酶凍干品及其制備方法

在審

• 申請號: 202011508450.3
• 申請日: 2020-12-18
• 公開（公告）號: CN114645040A
• 公開（公告）日: 2022-06-21
• 發明（設計）人: 秦偉雄;葉志杰;黃艷妮
• 申請（專利權）人: 桂林優利特醫療電子有限公司;桂林英美特生物技術研究所
• 主分類號: C12N9/96
• 分類號: C12N9/96;C12N9/12
• 代理公司: 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 石燕妮

本發明公開了一種穩定的肌酸激酶MB同工酶凍干品及其制備方法，首先，按照制備占比分別稱量4?羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)、海藻糖、牛血清白蛋白、甘露醇、二硫蘇糖醇、異十三醇聚乙二醇醚和疊氮化鈉，并依次加入占配制所需總量約80％的純化水的混合容器中攪拌至溶解，接著，測量所述混合容器中的pH值，并利用6mol/L鹽酸溶液或10mol/L氫氧化鈉溶液調節至設定范圍內；然后，稱量CK?MB酶，并加入到調節pH后的所述混合容器中攪拌均勻；最后，向所述混合容器中加入所述純化水至配置量，攪拌靜置15分鐘后，利用多種棕色玻璃瓶進行分裝，并按照凍干工藝參數進行凍干，具有良好的穩定性。

技術領域

本發明涉及醫學檢測技術領域，尤其涉及一種穩定的肌酸激酶MB同工酶凍干品及其制備方法。

背景技術

肌酸激酶(Creatine Kinase，CK)，也稱為肌酸磷酸激酶，主要存在于骨骼肌、心肌、腦組織和平滑肌中，臨床上主要用于骨骼肌疾病、心肌疾病及大腦疾病的診斷。目前，臨床診斷用肌酸激酶MB同工酶測定試劑盒進行測試時，所用校準品、質控品多為凍干品，其凍干品具有運輸方便、易儲存、有效期長等優點。但是復溶后，肌酸激酶MB同工酶依然會受到環境影響，易被氧化，導致測試結果不準確。因此，在保持肌酸激酶MB同工酶凍干品長期穩定性的前提下，解決復溶后不穩定的問題，對臨床測試診斷過程中肌酸激酶MB同工酶指標測定的準確性、可靠性有較大的改善。

目前，肌酸激酶MB同工酶凍干品制備原理：通過冷凍干燥技術，在低溫低壓條件下，冷凍的肌酸激酶MB同工酶凍干品基質液從凍結狀態直接升華，除去水分，完成干燥，同時可保持肌酸激酶MB同工酶理化性質和生理活性的長期穩定不變。另一方面，在凍干基質液中，添加穩定劑，可有效保護復溶后肌酸激酶MB同工酶的活性，使其在臨床應用過程中的使用和儲存更加長效穩定。目前市場上存在包含CK-MB項目的多項復合質控品，但是，作為多項復合質控品，相較單獨的CK-MB質控品，成本更高，也未必能滿足更專業的需求；復合質控品中CK酶的存在，會影響到CK-MB酶的測試結果；另一方面，也存在液體CK-MB質控品或者CK-MB稀釋劑，液體劑型不適用于長期的保存使用。

發明內容

本發明的目的在于提供一種穩定的肌酸激酶MB同工酶凍干品及其制備方法，具有良好的穩定性。

為實現上述目的，第一方面，本發明提供了一種穩定的肌酸激酶MB同工酶凍干品，所述穩定的肌酸激酶MB同工酶凍干品包括HEPES 0.10％～1.00％、海藻糖1.54％～3.02％、牛血清白蛋白3.55％～6.55％、甘露醇1.23％～3.86％、二硫蘇糖醇0.00％～0.50％、異十三醇聚乙二醇醚0.00％～0.50％、疊氮化鈉0.00％～0.50％、CK-MB酶100U/L～250U/L、pH為7.0～7.5。

其中，所述穩定的肌酸激酶MB同工酶凍干品包括HEPES 2g/L、海藻糖18g/L、牛血清白蛋白40g/L、甘露醇15g/L、二硫蘇糖醇0.5g/L、異十三醇聚乙二醇醚0.5mL/L、疊氮化鈉0.5g/L、CK-MB酶120U/L、pH為7.10。

其中，所述穩定的肌酸激酶MB同工酶凍干品包括HEPES 3.5g/L、海藻糖25g/L、牛血清白蛋白50g/L、甘露醇25g/L、二硫蘇糖醇1g/L、異十三醇聚乙二醇醚1mL/L、疊氮化鈉1g/L、CK-MB酶160U/L、pH為7.30。

第二方面，本發明提供了一種穩定的肌酸激酶MB同工酶凍干品的制備方法，如第一方面所述的一種穩定的肌酸激酶MB同工酶凍干品適用于一種穩定的肌酸激酶MB同工酶凍干品的制備方法，包括以下步驟：

按照制備占比分別稱量多種制備原料，并依次加入含有純化水的混合容器中攪拌至溶解，其中，多種所述制備原料包括HEPES、海藻糖、牛血清白蛋白、甘露醇、二硫蘇糖醇、異十三醇聚乙二醇醚和疊氮化鈉；

測量所述混合容器中的pH值，并利用6mol/L鹽酸溶液或10mol/L氫氧化鈉溶液調節至設定范圍內；