[發明專利]二維測流免疫層析試紙條及其制備方法

在審

• 申請號: 202011505897.5
• 申請日: 2020-12-18
• 公開（公告）號: CN112630434A
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發明（設計）人: 薛佳瑩;曹滌非;黃國慶;王雷;吳瓊;李瑤;孫堯;孫鑫
• 申請（專利權）人: 黑龍江省科學院高技術研究院
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/558;G01N33/543
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 岳泉清

1.二維測流免疫層析試紙條，其特征在于該二維測流免疫層析試紙條是沿著軸向在底板上依次組裝吸水墊A、第一NC膜、金標結合墊A、樣品墊、金標結合墊B、第二NC膜和吸水墊B，在第一NC膜的檢測線A上涂有CA125多抗抗體，第一NC膜的質控線A上涂有羊抗鼠IgG，在第二NC膜的檢測線B上涂有CA153多抗抗體，第二NC膜的質控線B上涂有羊抗鼠IgG，金標結合墊A上涂有標記CA125單抗抗體的膠體金溶液，金標結合墊B上涂有標記CA153單抗抗體的膠體金溶液。

2.二維測流免疫層析試紙條的制備方法，其特征在于該制備方法按照以下步驟實現：

一、向圓底燒瓶中加入氯金酸溶液，回流加熱至沸騰，攪拌情況下加入檸檬酸三鈉溶液反應至反應液變成變紅，繼續加熱10～15min，自然冷卻至室溫，得到膠體金溶液；

二、調節膠體金溶液的pH＝8.5～9.5，加入到離心管中，然后加入CA125單抗抗體，混合均勻反應10～15min，加入BSA水溶液，漩渦震蕩混勻，離心處理后收集沉淀物，沉淀物用硼酸鹽緩沖液重懸至原體積，再次離心處理，沉淀物用稀釋液稀釋至原體積的1/5，得到標記CA125單抗抗體的免疫金；

調節膠體金溶液的pH＝8.5～9.5，加入到離心管中，然后加入CA153單抗抗體，混合均勻反應10～15min，加入BSA水溶液，漩渦震蕩混勻，離心處理后收集沉淀物，沉淀物用硼酸鹽緩沖液重懸至原體積，再次離心處理，沉淀物用稀釋液稀釋至原體積的1/5，得到標記CA153單抗的免疫金；

三、將標記CA125單抗抗體的免疫金噴涂于結合墊A上，凍干處理，得到金標結合墊A；

將標記CA153單抗的免疫金噴涂于結合墊B上，凍干處理，得到金標結合墊B；

四、將CA125多抗抗體涂在第一NC膜的檢測線A上，將羊抗鼠IgG涂于第一NC膜的質控線A上，干燥后得到第一NC膜；

將CA153多抗抗體涂在第二NC膜的檢測線B上，將羊抗鼠IgG涂于第二NC膜的質控線B上，干燥后得到第二NC膜；

五、沿著軸向在底板上依次組裝吸水墊A、第一NC膜、金標結合墊A、樣品墊、金標結合墊B、第二NC膜和吸水墊B，得到二維測流免疫層析試紙條。

3.根據權利要求2所述的二維測流免疫層析試紙條的制備方法，其特征在于步驟一中檸檬酸三鈉溶液的質量濃度為1％。

4.根據權利要求2所述的二維測流免疫層析試紙條的制備方法，其特征在于步驟一中攪拌情況下加入檸檬酸三鈉溶液反應至反應液變成變紅，繼續加熱10min。

5.根據權利要求2所述的二維測流免疫層析試紙條的制備方法，其特征在于步驟二中調節膠體金溶液的pH＝9.0。

6.根據權利要求2所述的二維測流免疫層析試紙條的制備方法，其特征在于步驟二所述的離心處理是以13000r/min的速度離心15min。

7.根據權利要求2所述的二維測流免疫層析試紙條的制備方法，其特征在于步驟二中所述BSA水溶液的質量濃度為10％。

8.根據權利要求2所述的二維測流免疫層析試紙條的制備方法，其特征在于步驟四中干燥的溫度為37℃。