[發(fā)明專利]一種膠體金間接標(biāo)記、封閉的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202011504889.9 | 申請日： | 2020-12-18 |
| 公開（公告）號： | CN112649599B | 公開（公告）日： | 2022-08-16 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 付清山;王米格;劉麗君;李靜輝;于林;劉功成;渠海;付光宇;吳學(xué)煒 | 申請（專利權(quán)）人： | 鄭州安圖生物工程股份有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/532 | 分類號： | G01N33/532;G01N33/543 |
| 代理公司： | 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227 | 代理人： | 王歡 |
| 地址： | 450000 河南省*** | 國省代碼： | 河南;41 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 膠體 間接 標(biāo)記 封閉 方法 | ||
1.一種膠體金間接標(biāo)記、封閉的方法，其特征在于，包括：
步驟1：獲得包被有第一偶聯(lián)物的膠體金顆粒，然后加入第一封閉液封閉，得復(fù)合物1；
步驟2：向膠體金-第一偶聯(lián)物-第一封閉劑復(fù)合物中加入第二封閉液封閉，得復(fù)合物2；
步驟3：向復(fù)合物2中加入第二偶聯(lián)物，獲得膠體金蛋白偶聯(lián)物；
所述第一封閉劑液由第一封閉劑和緩沖液組成；
所述第二封閉劑液由第二封閉劑和緩沖液組成；
所述第一封閉劑和第二封閉劑依次為BSA、甘氨酸，或
所述第一封閉劑和第二封閉劑依次為PEG6000、組氨酸，
所述第一封閉劑和第二封閉劑依次為Casein、精氨酸；
所述第一封閉液中第一封閉劑的質(zhì)量百分含量為0.1-2%；所述第二封閉液中第二封閉劑的質(zhì)量百分含量為0.1-2%；
所述第一偶聯(lián)物選自his標(biāo)簽抗體、Flag標(biāo)簽抗體、C-Myc標(biāo)簽抗體、HA標(biāo)簽抗體和GST標(biāo)簽抗體中的一種；
所述第二偶聯(lián)物為標(biāo)簽標(biāo)記的待測蛋白，所述第二偶聯(lián)物的標(biāo)簽與所述第一偶聯(lián)物結(jié)合，所述標(biāo)簽選自his標(biāo)簽、Flag標(biāo)簽、C-Myc標(biāo)簽、HA標(biāo)簽、GST標(biāo)簽中的一種。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一封閉劑為BSA；
所述第二封閉劑為甘氨酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述第一封閉液、第二封閉液中的緩沖液選自PBS、Tris-HCL、CB、HEPES中的一種或多種。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述第一封閉液、第二封閉液中的緩沖液的pH為7.5。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一封閉液為包含0.1-2wt%BSA的PBS緩沖液，第二封閉液為0.1-2 wt%甘氨酸的PBS緩沖液。
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