[發明專利]一種檢測臨床研究血漿樣品中法匹拉韋濃度的方法在審
| 申請號: | 202011502416.5 | 申請日: | 2020-12-18 |
| 公開(公告)號: | CN112730653A | 公開(公告)日: | 2021-04-30 |
| 發明(設計)人: | 楊勇;陳云輝;鐘勘;姜金方;周茂金 | 申請(專利權)人: | 蘇州海科醫藥技術有限公司 |
| 主分類號: | G01N30/02 | 分類號: | G01N30/02 |
| 代理公司: | 北京同輝知識產權代理事務所(普通合伙) 11357 | 代理人: | 劉洪勛 |
| 地址: | 215000 江蘇省*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 檢測 臨床 研究 血漿 樣品 中法 匹拉韋 濃度 方法 | ||
1.一種檢測臨床研究血漿樣品中法匹拉韋濃度的方法,其特征在于,包括以下步驟:
步驟1:血漿樣品前處理,在1.5mL離心管中加入血漿樣品,內標溶液,加入甲醇,渦流振蕩,離心,取出上清轉移至96孔板中,進行LC-MS/MS分析;
步驟2:色譜分離;
色譜條件,色譜柱:Eclipse Plus C18柱,3.5μm,100×4.6mm;進樣量:1μL;柱溫:40℃;流動相A相選用10mM甲酸銨水溶液含0.3%,流動相B項為甲醇,采用體積比為48:52的A:B相等度洗脫;自動進樣器溫度為4℃,流動相的流速為:0.65mL/min;
步驟3:質譜檢測;
質譜條件:電噴霧電離源;電壓為-4500V;離子源溫度為500℃;Curtain Gas和CID壓力分別為40和9psi;掃描模式為-MRM;監測離子反應分別為:法匹拉韋,m/z 156→m/z 113;法匹拉韋-15N3,m/z 159→m/z 115;CE為-23eV;DP為-60V;掃描時間為200ms。
2.根據權利要求1所述的一種超高靈敏的檢測人血漿中法匹拉韋濃度的方法,其特征在于:步驟1血漿樣品前處理,取50.0μL血漿樣品,分別加入50.0μL內標工作液、200μL甲醇,渦流10min,以4500rpm轉速離心10min,取出上清200μL轉移至96孔板中,取1.00μL進行LC-MS/MS分析。
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