[發明專利]一種畢赤酵母重組菌、培養方法及用途

在審

• 申請號: 202011502087.4
• 申請日: 2020-12-18
• 公開（公告）號: CN112725211A
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發明（設計）人: 彭志恩;宋浩;柳學偉;巨曉芝;楊曉瑜;郭萬成
• 申請（專利權）人: 奧銳特藥業（天津）有限公司;揚州聯澳生物醫藥有限公司
• 主分類號: C12N1/19
• 分類號: C12N1/19;C12N15/16;C12N15/81;C07K14/605;A61K38/26;A61P3/10;C12R1/84
• 代理公司: 浙江千克知識產權代理有限公司 33246
• 代理人: 裴金華

1.一種畢赤酵母重組菌，其特征在于，所述畢赤酵母重組菌包含表達合成GLP-1類似物的表達系統，所述GLP-1類似物的形式包括：GLP-1截短和/或N-末端延伸的形式和/或部分氨基酸突變形式。

2.根據權利要求1所述的一種畢赤酵母重組菌，其特征在于，所述表達系統包括合成所述GLP-1類似物的基因，所述基因至少包括：Arg³⁴GLP-1_（7-37）基因和/或Arg³⁴GLP-1_（9-37）基因，所述Arg³⁴GLP-1_（7-37）基因、Arg³⁴GLP-1_（9-37）基因的序列分別如SEQ ID NO：2，3所示。

3.根據權利要求2所述的一種畢赤酵母重組菌，其特征在于，所述畢赤酵母重組菌包含表達合成GLP-1類似物的重組構建物，所述重組構建物至少包括：所述Arg³⁴GLP-1_（7-37）基因和/或Arg³⁴GLP-1_（9-37）基因。

4.根據權利要求3所述的一種畢赤酵母重組菌，其特征在于，所述表達合成GLP-1類似物的重組構建物，由所述Arg³⁴GLP-1_（7-37）基因和/或Arg³⁴GLP-1_（9-37）基因，與載體pPinkα-HC連接，以在畢赤酵母重組菌中表達合成GLP-1類似物。

5.一種用于培養權利要求1~4任一一種所述畢赤酵母重組菌的培養方法，將所述畢赤酵母重組菌在液體培養基中進行高密度發酵培養。

6.根據權利要求5所述的一種畢赤酵母重組菌的培養方法，其特征在于，所述畢赤酵母重組菌納入了與啟動子可操作地連接的所述基因，所述啟動子由甲醇誘導。

7.根據權利要求5所述的一種畢赤酵母重組菌的培養方法，其特征在于，所述液體培養基中pH值為4.0~5.0。

8.根據權利要求1~4任一所述的一種畢赤酵母重組菌，其特征在于，所述畢赤酵母重組菌宿主為PichiaPink ? Strain 1、PichiaPink ? Strain 2、PichiaPink ? Strain 3、PichiaPink ? Strain 4中的一種。

9.根據權利要求1~4任一所述的一種畢赤酵母重組菌的用途，所述畢赤酵母重組菌用于高效表達合成GLP-1類似物。

10.根據權利要求9所述畢赤酵母重組菌的用途，所述GLP-1類似物用于制備多肽藥物。