[發(fā)明專利]一種寡核苷酸、載體及制備方法和應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202011492355.9 | 申請日： | 2020-12-17 |
| 公開（公告）號： | CN112574991B | 公開（公告）日： | 2023-03-17 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 沈小鵬;張靜宜;畢超;朱國萍;王敖;李蒙;劉忠賢;王春光 | 申請（專利權(quán)）人： | 安徽師范大學 |
| 主分類號： | C12N15/113 | 分類號： | C12N15/113;C12N15/10;C12N15/85;A61K31/713;A61P21/00 |
| 代理公司： | 南京匠橋?qū)＠碛邢薰?32568 | 代理人： | 陳秀芳 |
| 地址： | 241000 安*** | 國省代碼： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 寡核苷酸 載體 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種寡核苷酸在制備修復強直性肌營養(yǎng)不良癥I型中成肌功能障礙的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述寡核苷酸的正義鏈核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，反義鏈的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述寡核苷酸在制備修復強直性肌營養(yǎng)不良癥I型中成肌功能障礙的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，寡核苷酸的制備方法包括如下步驟：
步驟一、選取作用于Postn的mRNA上2063-2085區(qū)域的siRNA分子，得到siRNA的正義鏈序列與反義鏈序列；
步驟二、將步驟一得到的siRNA的正義鏈序列與反義鏈序列置于寡核苷酸模板中，獲得寡核苷酸的正義鏈核苷酸序列和反義鏈的核苷酸序列；
步驟三、將寡核苷酸的正義鏈核苷酸序列和反義鏈的核苷酸序列經(jīng)退火融合成雙鏈、一次孵育、加入10 mM ATP及10 U/uL T4 Kinase繼續(xù)二次孵育后得到；
所述步驟一中siRNA的正義鏈序列如SEQ ID NO.1所示，反義鏈序列如SEQ ID NO.2所示；
所述步驟三中一次孵育是先將融合成雙鏈的混合體系置于94℃孵育4分鐘，之后置于恒溫70℃的水浴中孵育10分鐘，之后關(guān)閉對水浴的加熱使水浴逐漸緩慢降溫至室溫；
所述步驟三中二次孵育是先在37℃孵育60分鐘，之后在65℃孵育10分鐘。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述寡核苷酸在制備修復強直性肌營養(yǎng)不良癥I型中成肌功能障礙的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物為下調(diào)Postn蛋白表達量的藥物。
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