[發明專利]一種用于制備水凝膠的膠原蛋白及其制備方法有效
| 申請號： | 202011491036.6 | 申請日： | 2020-12-17 |
| 公開（公告）號： | CN112521491B | 公開（公告）日： | 2022-06-10 |
| 發明（設計）人： | 王玠;許菲;曹俊 | 申請（專利權）人： | 江南大學;江蘇省血吸蟲病防治研究所 |
| 主分類號： | C07K14/78 | 分類號： | C07K14/78;C12N15/70;C12N5/00;A61K47/42;A61L27/24;A61L27/52 |
| 代理公司： | 北京睿博行遠知識產權代理有限公司 11297 | 代理人： | 張燕平 |
| 地址： | 214000 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 制備 凝膠 膠原 蛋白 及其 方法 | ||
1.一種采用膠原蛋白S-VCL-S制備水凝膠的方法，其特征在于：以質量濃度為3%-4%膠原蛋白S-VCL-S為原料，質量濃度為0.05%-0.1%的雙氧水為交聯劑進行交聯，使原料分子間通過二硫鍵交聯形成水凝膠，所述膠原蛋白S-VCL-S核苷酸序列為SEQ ID No.1所示。
2.如權利要求1所述采用膠原蛋白S-VCL-S制備水凝膠的方法，其特征在于：所述膠原蛋白S-VCL-S的制備方法為：將帶有目標膠原蛋白基因的pET-28a質粒轉化大腸桿菌BL21（DE3），挑取單克隆進行搖瓶發酵生產，收集菌體，得到重組蛋白；將重組蛋白分離純化后最終得到目標膠原蛋白。
3.權利要求1所述采用膠原蛋白S-VCL-S制備水凝膠的方法，其特征在于：膠原蛋白S-VCL-S制備的具體步驟如下：
（1）設計膠原蛋白序列，將設計好的基因片段連接至pET-28a質粒上，并設計雙酶切位點，以驗證攜帶的基因片段；
（2）采用已經驗證片段的pET-28a質粒轉化大腸桿菌BL21（DE3），挑取單克隆進行蛋白表達測試，驗證其轉化結果；
（3）挑取單克隆依次進行搖瓶發酵生產、分離純化，最后得到目標膠原蛋白。
4.權利要求1所述方法制備所得水凝膠的應用，其特征是：將其應用于制備緩釋親水性藥物的載體，并且具有氧化還原響應性，能夠響應H2O2氧化發生分子相變。
5.權利要求1所述方法制備所得水凝膠的應用，其特征是：將其應用于制備細胞支架材料，能夠支持細胞的粘附和增殖。
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