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[發明專利]一種血清代謝譜分子量校準品試劑盒及其制備方法、使用方法有效

專利信息
申請號: 202011490286.8 申請日: 2020-12-16
公開(公告)號: CN112526039B 公開(公告)日: 2022-07-15
發明(設計)人: 鄔建敏;陳曉明;余捷凱;欒春燕 申請(專利權)人: 杭州匯健科技有限公司;杭州匯健智譜醫學檢驗實驗室有限公司
主分類號: G01N30/06 分類號: G01N30/06;G01N30/08;G01N30/72;G01N30/86
代理公司: 杭州裕陽聯合專利代理有限公司 33289 代理人: 金方瑋
地址: 310051 浙江省杭州市濱*** 國省代碼: 浙江;33
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 血清 代謝 分子量 校準 試劑盒 及其 制備 方法 使用方法
【權利要求書】:

1.一種血清代謝譜分子量校準品試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括代謝分子校準品、溶解液與分子量校準列表,納米質譜芯片;其中,代謝分子校準品與溶解液的配比為:1份代謝分子校準品對應1-5份溶解液;代謝分子校準品從血清樣本中提取得到;

其中,血清樣本的分子量校準列表包括:負離子模式下質荷比m/z = 152.9699、255.2330、279.2330、283.2643、303.2330、367.1551、435.2482、465.3030、616.4784、642.4990、687.5554、726.6026、752.6139、778.5289、794.5272、833.5268、861.5499、885.5499、904.6189、922.6131,可校準100-1000 Da范圍;正離子模式下質荷比m/z =184.1097、437.1032 、459.1522、478.2330、502.2330、546.2744、635.1439、659.2695、678.5991、690.4992、725.5410、780.5514、808.5560、832.5827,可校準150-900 Da范圍;

所述試劑盒的制備方法包括如下步驟:

步驟一,代謝分子校準品的制備:使用提取試劑提取血清中的代謝分子,獲得含有代謝分子的校準品;

步驟二,代謝分子校準品中代謝分子的分子量的測定:

1)溶解液與代謝分子校準品混合得到代謝分子校準品溶液,在代謝分子校準品溶液中加入純品校準品作為內標,制備成含內標的代謝分子校準品溶液;

2)將含內標的代謝分子校準品溶液點樣于載樣臺上,自然干燥;

3)將載樣臺放入質譜儀中進行正離子模式和負離子模式檢測,用內標法確認代謝分子校準品溶液中兩種檢測模式下各個質譜峰的分子量;

4)挑選出峰強度高、穩定的質譜峰進行二級質譜檢測,獲取二級質譜圖,對其進行結構鑒定,得到理論準確分子量;

5)對含有內標的代謝分子校準品再次進行檢測,以純品校準品和已明確結構、理論準確分子量的峰為內標,二次確認和修正代謝分子校準品在兩種檢測模式下除已知理論分子量以外的峰的準確分子量,獲得準確分子量列表;

6)挑選準確分子量列表中強度高、穩定的峰,在質譜儀控制軟件種建立分子量校準列表;

步驟三,按照如下配方配置試劑盒:配方包括:代謝分子校準品、溶解液、分子量校準列表;代謝分子校準品與溶解液的配比為:1份代謝分子校準品對應1-5份溶解液。

2.根據權利要求1所述的一種血清代謝譜分子量校準品試劑盒的使用方法,其特征在于,包括內標校準法和外標校準法;內標校準法用于待測樣本中存在與分子量校準品中重疊的代謝分子,外標校準法對待測樣本的成份不做規定。

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