[發明專利]一種定性檢測HLA-B*1502等位基因的試劑盒及方法

在審

• 申請號: 202011481756.4
• 申請日: 2020-12-16
• 公開（公告）號: CN113151435A
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發明（設計）人: 丁佳女;鄭宜文;安迪;于歡
• 申請（專利權）人: 杭州百邁生物股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及檢測HLA?B*1502基因多態性的熒光PCR試劑盒和檢測方法。包括檢測HLA?B*1502基因多態性的上下游引物和探針，還包括特異性檢測的上下游引物和探針，以及檢測內參基因的上下游引物和探針。利用本發明能夠準確、靈敏、特異的從HLA?B*1502基因多態的基因型中檢測出目的基因的變異。

技術領域

本發明涉及分子生物學和醫學領域，具體涉及HLA-B*1502等位基因檢測試劑、試劑盒和檢測方法。

背景技術

隨著基因檢測技術的成熟，藥物基因組學領域得到了迅猛發展，越來越多的藥物基因組生物標記物及其檢測方法相繼涌現。藥物基因組學已成為指導臨床個體化用藥、評估嚴重藥物不良反應發生風險、指導新藥研發和評價新藥的重要工具，部分上市的新藥僅限于特定基因型的適應癥患者。美國FDA已批準在140余種藥物的藥品標簽中增加藥物基因組信息，涉及的藥物基因組生物標記物42個。此外，部分行業指南也將部分非FDA批準的生物標記物及其特性(如MGMT基因甲基化)的檢測列入疾病的治療指南。藥物反應相關基因及其表達產物的分子檢測是實施個體化藥物治療的前提。

癲癇是一種世界范圍內常見的神經系統疾病，通常需要進行長期的抗癲癇治療。在我國約有癲癇患者近千萬，且以每年新增40萬的速率遞增。治療癲癇的方法以藥物治療為主，其中使用較多的為芳香族抗癲癇藥，該類藥物因具有類似的化學結構并均攜帶苯環而命名。臨床實踐中通，芳香族抗癲癇藥物常見的不良反應包括皮疹、鎮靜、嗜睡、頭暈、共濟失調、認知障礙等，且可導致嚴重的皮膚不良反應史蒂文斯約翰綜合征SJS或中毒性表皮松解壞死TEN，其致死率高達30％～40％，避免SJS/TEN的發生是芳香族抗癲癇藥物治療過程中的重大挑戰之一。近年的研究表明，由芳香族抗癲癇藥物所致的嚴重皮膚不良反應SJS或TEN與患者HLA-B*1502等位基因存在一定的相關性。

HLA抗原是人類主要組織相容性復合體(MHC)的表達產物，在免疫系統中主要負責細胞之間的相互識別和誘導免疫反應，調節免疫應答的功能。HLA位于人類6號染色體短臂的21.31區，約含360萬個堿基對，是目前已知的人類染色體中基因密度最高、多態性最豐富的區域，分為HLA-Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ類基因。經典的HLA-Ⅰ類基因包括HLA-A、HLA-B和HLA-C三類，經典的Ⅱ類基因一般指DR、DP和DQ，HLA-Ⅲ類基因與前兩類不同，除包含腫瘤壞死因子(Tumour Necrosis Fa ctor，TNF)基因、淋巴毒素α(lymphotoxin alpha，LTA)基因、熱休克蛋白基因等具有免疫相關功能的基因外，還包括許多非免疫相關基因。其中HLA-B是人類基因組中多態性最高的基因，已有超過1800個變異型被報道，HLA-B*1502是HLA-B基因的一個基因型，其多態性與亞裔患者使用芳香族抗癲癇藥物時導致嚴重皮膚不良反應SJS/TEN的風險具有密切相關性。根據國家衛生計生委醫政醫管局印發的《藥物代謝酶和藥物作用靶點基因檢測技術指南》(試行)指出攜帶HLA-B*1502等位基因者慎用卡馬西平和苯妥英，表明攜帶HLA-B*1502等位基因者使用芳香族抗癲癇藥物治療時患嚴重皮膚不良反應SJS/TEN的風險更高。美國FDA已批準在卡馬西平藥品說明書中增加漢族及東南亞裔人群在服用卡馬西平前進行HLA-B*1502等位基因篩查的建議，HLA-B*1502陽性的個體應慎用卡馬西平，以避免出現嚴重的皮膚毒性反應。