[發明專利]一種定性檢測HLA-B*1502等位基因的試劑盒及方法

在審

• 申請號: 202011481756.4
• 申請日: 2020-12-16
• 公開（公告）號: CN113151435A
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發明（設計）人: 丁佳女;鄭宜文;安迪;于歡
• 申請（專利權）人: 杭州百邁生物股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測HLA-B*1502等位基因的試劑盒，其特征在于，包括檢測HLA-B*1502的上游引物SEQ ID NO.1、下游SEQ ID NO.2和探針SEQ ID NO.3，所述序列分別是：

SEQ ID NO.1：CGCGAGTCCGAGGATAGC

SEQ ID NO.2：GTTGTAGTACCGCGCAGGT

SEQ ID NO.3：CCGGAACACACAGATCTCC。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，還包括檢測HLA-B*1502特異性的上游引物SEQ ID NO.4，下游引物SEQ ID NO.5和探針SEQ ID NO.6，所述序列分別是：

SEQ ID NO.4：TGTCACATCATCAAGAGGA

SEQ ID NO.5：TGATCTGAGCCGCCGTGT

SEQ ID NO.6：TCCGCGGGTATGACCAGTCCGCCTA。

3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，還包括內控檢測上游引物SEQID NO.7、下游引物SEQ ID NO.8和探針SEQ D NO.9，所述序列分別是：SEQ ID NO.7：TTGTGGGCTGTAATCATCGTCTA

SEQ ID NO.8：GTTCTCTTTCACTGACATCTGCAAA

SEQ ID NO.9：CCCACACAAATCTCTCCCTGGCATTG。

4.根據權利要求1至3之一所述的試劑盒，其特征在于，探針核酸序列5’采用FAM、TET、VIC、HEX和ROX中的一種修飾，探針核酸序列3’采用MGB、TAMRA、BHQ1基團中的一種修飾。

5.一種檢測HLA-B*1502基因多態性的方法，包括如下步驟：

步驟1：對臨床樣本血液樣本進行簡單預處理，獲得血液預處理樣本；

步驟2：將步驟1中的血液預處理樣本與檢測HLA-B*1502基因多態性的PCR反應試劑混勻，混勻后按預先設定的PCR反應程序進行PCR擴增；

步驟3：結果判讀；

所述基因多態性的PCR反應試劑包括檢測HLA-B*1502的上游引物SEQ ID NO.1、下游SEQ ID NO.2和探針SEQ ID NO.3，所述序列分別是：

SEQ ID NO.1：CGCGAGTCCGAGGATAGC

SEQ ID NO.2：GTTGTAGTACCGCGCAGGT

SEQ ID NO.3：CCGGAACACACAGATCTCC。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述基因多態性的PCR反應試劑還包括區分HLA-B*1502特異性的上游引物SEQ ID NO.4，下游引物SEQ ID NO.5和探針SEQ ID NO.6，所述序列分別是：

SEQ ID NO.4：TGTCACATCATCAAGAGGA

SEQ ID NO.5：TGATCTGAGCCGCCGTGT

SEQ ID NO.6：TCCGCGGGTATGACCAGTCCGCCTA。

7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述結果判讀的陽性結果為檢測通道CT值≤35，特異性位點檢測通道CT值≤35且內參CT值≤35，則HLA-B*1502基因檢測為陽性。

8.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，陽性對照品CT≤35，陰性對照品CT＞35或為Undet.，則HLA-B*1502基因檢測為陽性。