[發(fā)明專利]檢測EB病毒/HCMV的試劑盒及其應(yīng)用

在審

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• 申請日: 2020-12-15
• 公開（公告）號(hào): CN112415205A
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉為勇;張祺;劉芳;劉映樂;屈三甫;梅益
• 申請（專利權(quán)）人: 武漢大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/58
• 分類號(hào): G01N33/58;G01N33/569
• 代理公司: 武漢科皓知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 張火春

1.一種快速檢測EB病毒/HCMV的試劑盒，包括以下組分：A)固定樣本溶液的蛋白包被板，B)蛋白包被液，C)封閉液，D)漂洗液，E)樣本前處理液，和F)帶有熒光基團(tuán)標(biāo)記的核酸適配體，其特征是，核酸適配體含有EB病毒的核酸適配體和HCMV的核酸適配體，兩種適配體的熒光基團(tuán)相異。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測EB病毒/HCMV的試劑盒，其特征在于EB病毒的核酸適配體具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，HCMV的核酸適配體具有SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測EB病毒/HCMV的試劑盒，其特征在于B)蛋白包被液是由35mM NaHCO₃，15mM Na₂CO₃,pH 9.3-pH 9.9組成的，C)封閉液是由136mM NaCl,2.6mM KCl,2mM KH₂PO₄,8mM Na₂HPO₄,0.05％Tween-20,1％BSA,pH 7.1-pH 7.7組成的，D)漂洗液是由136mM NaCl,2.6mM KCl,2mM KH₂PO₄,8mM Na₂HPO₄,0.05％Tween-20,pH 7.1-pH 7.7組成的，E)樣本前處理液是由150mM NaCl,1％Triton X-100,50mM Tris,pH7.8-pH8.2組成的。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測EB病毒/HCMV的試劑盒，其特征在于B)蛋白包被液是由35mM NaHCO₃，15mM Na₂CO₃,pH 9.6組成的，C)封閉液是由136mM NaCl,2.6mM KCl,2mMKH₂PO₄,8mM Na₂HPO₄,0.05％Tween-20,1％BSA,pH 7.4組成的，D)漂洗液是由136mM NaCl,2.6mM KCl,2mM KH₂PO₄,8mM Na₂HPO₄,0.05％Tween-20,pH 7.4組成的，E)樣本前處理液是由150mM NaCl,1％Triton X-100,50mM Tris,pH8.0組成的。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測EB病毒/HCMV的試劑盒，其特征在于核酸適配體序列上接有功能基團(tuán)，功能基團(tuán)為各種生物素標(biāo)記物、發(fā)光標(biāo)記物和酶標(biāo)標(biāo)記物，發(fā)光標(biāo)記物選自FAM、VIC熒光基團(tuán)中的一種，兩種適配體的熒光基團(tuán)相異。功能基團(tuán)通過共價(jià)鍵的方式連接到核酸適配體的5’端。

6.一種制備權(quán)利要求1中檢測EB病毒/HCMV的試劑盒，其特征是，EB病毒的核酸適配體以EB病毒靶蛋白抗原表位具有如SEQ ID No.3所示序列氨基酸，通過SELEX技術(shù)篩選所得；HCMV的核酸適配體以HCMV靶蛋白抗原表位具有如SEQ ID No.4所示序列氨基酸，通過SELEX技術(shù)篩選所得；再將熒光基團(tuán)以共價(jià)鍵的形式連接到核酸適配體的5’端。

7.權(quán)利要求1中所述檢測的試劑盒在同時(shí)檢測EB病毒/HCMV中的應(yīng)用。