[發明專利]一種新型冠狀病毒IgM、IgG和IgA聯合檢測試劑盒以及檢測方法

在審

• 申請號: 202011478302.1
• 申請日: 2020-12-15
• 公開（公告）號: CN112858674A
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發明（設計）人: 黃若磐;張本越
• 申請（專利權）人: 瑞博奧（廣州）生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/543;G01N33/533
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 蘇云輝

本發明涉及病毒檢測技術領域，尤其涉及一種新型冠狀病毒IgM、IgG和IgA聯合檢測試劑盒以及檢測方法。本發明公開了一種新型冠狀病毒IgM、IgG和IgA的聯合檢測試劑盒，該試劑盒以包被有所述新型冠狀病毒SARS?CoV?2的多肽或其片段的珠子作為抗原珠，引入包被有牛血清蛋白的珠子作為包被有所述新型冠狀病毒SARS?CoV?2抗原的珠子的對照，通過比較抗原珠與對照珠的熒光信號比率，可以確定SARS?CoV?2的人IgG，IgA和IgM抗體的真實信號。采用該試劑盒檢測SARS?CoV?2的假陽性率極低。

技術領域

本發明涉及病毒檢測技術領域，尤其涉及一種新型冠狀病毒IgM、IgG 和IgA聯合檢測試劑盒以及檢測方法。本申請要求2020年9月29日提交的 美國專利(專利申請號為US17/036,042)的權益，在此將上述申請的內容引 用并入本文。

背景技術

人類感染SARS-CoV-2可能會導致嚴重的肺炎，并伴有大量炎性細胞因 子的產生(“細胞因子風暴”)。與病毒有關的疾病具有典型的肺炎癥狀，并伴 有其他一些癥狀，例如肌肉疼痛，頭痛和喉嚨痛等，通常被稱為 COVID-19。

目前，尚無針對COVID-19感染的有效治療方法。因此，預后很大程度 上取決于宿主免疫系統的功效。已經開發出針對病毒特異性IgM和IgG抗體 的早期診斷試劑盒，或檢測病毒水平的qRT-PCR試劑盒，但某些患者血清中 高水平的免疫球蛋白引起的假陽性結果的高百分比也已成為血清抗病毒免疫 球蛋白(Ig)檢測的挑戰。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種新型冠狀病毒IgM、IgG和IgA聯合檢測試 劑盒以及檢測方法，該聯合檢測試劑盒可檢測SARS-CoV-2的人IgG，IgA和 IgM抗體的真實信號，采用該試劑盒檢測的假陽性結果極低。

其技術方案如下：

本發明提供了一種新型冠狀病毒IgM、IgG和IgA的聯合檢測試劑盒，包 括：包被有新型冠狀病毒SARS-CoV-2抗原的珠子、包被有牛血清白蛋白的 珠子和熒光素標記的抗體或其抗原的結合片段；

所述SARS-CoV-2抗原為SARS-CoV-2的多肽或其片段；

所述抗體為抗人IgG抗體，抗人IgA抗體和抗人IgM抗體。

所述珠子至少為兩種熒光強度不同的珠子，珠子的熒光強度的不同使它 們可以彼此分開。

本發明提供的新型冠狀病毒IgM、IgG和IgA的聯合檢測試劑盒，該試劑 盒引入包被有牛血清蛋白的珠子作為包被有所述新型冠狀病毒SARS-CoV-2 抗原的珠子的對照，通過比較兩組珠子的熒光信號比率，可以確定 SARS-CoV-2的人IgG，IgA和IgM抗體的真實信號。采用該試劑盒檢測 SARS-CoV-2的假陽性率極低。

本發明試劑盒中，所述SARS-CoV-2的蛋白或其片段為SARS-CoV-2刺 突蛋白或其片段以及SARS-CoV-2核衣殼蛋白或其片段中的至少一種，優選 為SARS-CoV-2刺突蛋白或其片段。SARS-CoV-2刺突蛋白(S蛋白)的氨基 酸序列如SEQ ID NO：1所示(GenBank登錄號：QHD43416)，其中，氨基 酸V16-Q690是減去前導序列的序列。SARS-CoV-2刺突蛋白或其片段優選包 含受體結合結構域(RBD)的片段，例如：包括但不限于SEQ ID NO：1氨 基酸R319-F541(SEQ ID NO：2)或之具有親和力的抗原性片段，并與抗 SARS-CoV-2特異性抗體結合的片段。可通過本領域技術人員熟知的方法獲 得SARS-CoV-2抗體的抗原片段SEQ ID NO：2，并確認其與抗SARS-CoV-2 抗體結合。