[發明專利]一種治療腎臟疾病的中藥組合物的指紋圖譜建立方法及其應用

在審

• 申請號: 202011476412.4
• 申請日: 2020-12-15
• 公開（公告）號: CN114636760A
• 公開（公告）日: 2022-06-17
• 發明（設計）人: 朱雄;羅紅艷;李垚
• 申請（專利權）人: 云南雷允上理想藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/34;G01N30/32;G01N30/54
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司 11280
• 代理人: 李渤;郭廣迅

1.一種治療腎病的中藥組合物的指紋圖譜建立方法，其采用高效液相色譜法，所述高效液相色譜法的條件包括：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以20mmol/L乙酸銨水溶液為流動相B，按照0至160分鐘內流動相A與流動相B的體積比從3：97變化至100：0的梯度進行洗脫；檢測波長在0至100min內為274nm，在100至160min內為262nm；

其中，所述治療腎病的中藥組合物由以下重量份數的原料制成：太子參20-30份，半夏20-30份，茯苓16-24份，丹參56-84份，紅花8-12份，黃連8-12份，陳皮8-12份，大黃32-48份，牛膝16-24份和甘草8-12份；優選地，所述半夏為法半夏。

2.根據權利要求1所述的指紋圖譜建立方法，其中所述洗脫的梯度如下所示：

3.根據權利要求1或2所述的指紋圖譜建立方法，其中所述洗脫的流動相流速在0至85min內為1.0至0.8mL/min；在85至110min內為0.8mL/min；在110至120min內為0.8至1.0mL/min；在120至160min內為1.0mL/min。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的指紋圖譜建立方法，其中所述高效液相色譜的條件還包括：柱溫為15～40℃，優選為20℃；優選地，進樣量為10μL；優選地，所述高效液相色譜的理論板數按鹽酸小檗堿計算不低于50000。

5.根據權利要求1至4中任一項所述的指紋圖譜建立方法，其中所述乙酸銨水溶液的pH為4。

6.根據權利要求1至5中任一項所述的指紋圖譜建立方法，其包括如下步驟：

(1)對照品溶液的制備：取對照品，加甲醇制成對照品溶液；

(2)供試品溶液的制備：取所述治療腎病的中藥組合物，加甲醇或甲醇水溶液，超聲處理，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；

(3)測定方法：分別取步驟(1)制備的對照品溶液與步驟(2)制備的供試品溶液，注入高效液相色譜儀，按照所述高效液相色譜法的條件獲得高效液相圖譜。

7.根據權利要求6所述的指紋圖譜建立方法，其包括如下步驟：

(1)對照品溶液的制備：取對照品，加甲醇制成對照品溶液；

(2)供試品溶液的制備：取所述治療腎病的中藥組合物0.8g，加入體積比為70％甲醇水溶液25mL，超聲處理10～60分鐘，例如30分鐘，放冷，用體積比為70％甲醇水溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；

(3)測定方法：分別取步驟(1)制備的對照品溶液與步驟(2)制備的供試品溶液，注入高效液相色譜儀，按照所述高效液相色譜法的條件獲得高效液相圖譜。