[發明專利]一種利用天然氨基單糖降低大腸桿菌耐壓性的方法

有效

• 申請號: 202011468254.8
• 申請日: 2020-12-14
• 公開（公告）號: CN112586657B
• 公開（公告）日: 2021-08-03
• 發明（設計）人: 李會
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所
• 主分類號: A23L5/20
• 分類號: A23L5/20
• 代理公司: 北京中建聯合知識產權代理事務所(普通合伙) 11004
• 代理人: 王靈靈

一種利用天然氨基單糖降低大腸桿菌耐壓性的方法，屬于消毒滅菌領域技術領域，具體方法包括配置MES緩沖液；用磷酸鹽緩沖液配制質量濃度為10%的氨基葡萄糖溶液并溫和孵育；在MES緩沖液中接種大腸桿菌；在大腸桿菌中加入溫和孵育后的氨基葡萄糖溶液，形成樣品溶液；迅速移入超高壓設備內，對樣品進行超高壓處理，最后進行后續大腸桿菌的菌落培養和總數檢測。本發明首次將氨基葡萄糖與超高壓技術協同用于大腸桿菌的殺滅，即采用添加經溫和孵育的氨基葡萄糖的方法，對大腸桿菌進行協同殺滅；可有效減低大腸桿菌耐壓性；使用的材料如氨基葡萄糖等價格低廉，配制及使用方法簡單，對技術人員要求低，適合食品加工企業大規模采用。

技術領域

本發明涉及消毒滅菌領域，具體涉及一種利用天然氨基單糖降低大腸桿菌耐壓性的方法。

背景技術

大腸桿菌特別是食源性致病菌腸出血性大腸桿菌(EHEC)長期威脅大眾食品安全，是食品安全領域的重要隱患因素之一，該類致病菌的感染劑量非常低，不到10個細胞即可致人死亡，致死率高達30％。近年來EHEC曾在牛肉、豆芽和面粉等多種食品中被檢出，造成嚴重的食品安全事件。

傳統食品加工領域通常采用熱加工方法處理殺滅EHEC，效果不夠理想。近年來，超高壓技術(high hydrostatic pressure，HHP)作為非熱加工技術越來越受歡迎，在400～600MPa條件下，HHP可有效減少致病菌和腐敗菌，從而達到食品在低溫條件下的殺菌效果，同時保留食品的品質，該技術目前已經在世界范圍內得到廣泛應用。然而研究發現，即使食品經過HHP處理，依然有部分致病菌存活下來。曾有研究發現，將100株大腸桿菌E.coli分別進行HHP(600MPa)處理，發現絕大多數E.coli的菌落數減少不到5log(cfu/mL)，由此可知大多數屬于耐壓菌株。因此，如何實現大腸桿菌的高效殺滅，是目前消毒滅菌技術領域的一大難題。

氨基葡萄糖又稱葡萄糖胺、葡糖胺或氨基葡糖，是葡萄糖的一個羥基被氨基取代后的化合物，是自然界含量最豐富的單糖之一，是生物細胞內許多重要多糖的基本組成單位，經常被用于骨關節炎的膳食輔助治療。目前氨基葡萄糖與HHP對大腸桿菌的共同作用尚未見明確報道。

發明內容

本發明目的在于提供一種利用天然氨基單糖降低大腸桿菌耐壓性的方法，解決現有技術中即使經過HHP處理、依然有較高比例的大腸桿菌菌株存活下來、不能有效降低到合理標準的問題。

為實現上述技術目的，本發明采用如下技術方案：

一種利用天然氨基單糖降低大腸桿菌耐壓性的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一、配置MES緩沖液，調整pH范圍為5～6；

驟二、用pH為7.4的磷酸鹽緩沖液配制質量濃度為10％的氨基葡萄糖溶液，將其置于35℃～38℃條件下溫和孵育1～3天；

步驟三、在步驟一配置的MES緩沖液中接種大腸桿菌，至大腸桿菌數為10⁶～10⁸log(cfu/mL)；

步驟四、在步驟三培養的大腸桿菌中加入步驟二溫和孵育后的氨基葡萄糖溶液，至氨基葡萄糖的最終質量濃度為1.0％～3.0％，形成樣品溶液；

步驟五、迅速取一定量的步驟四的樣品溶液移入超高壓設備內；

步驟六、對樣品進行超高壓處理，壓力為600MPa，溫度為20℃，時間為3～15min；

步驟七、將步驟六處理后的樣品溶液從超高壓設備內取出；

步驟八、進行后續大腸桿菌的菌落培養和總數檢測。

其中，作為本發明的優選技術方案，所述步驟二中，將質量濃度10％的氨基葡萄糖溶液置于37℃條件下溫和孵育48小時。