[發明專利]一種利用天然氨基單糖降低大腸桿菌耐壓性的方法有效
| 申請號: | 202011468254.8 | 申請日: | 2020-12-14 |
| 公開(公告)號: | CN112586657B | 公開(公告)日: | 2021-08-03 |
| 發明(設計)人: | 李會 | 申請(專利權)人: | 中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所 |
| 主分類號: | A23L5/20 | 分類號: | A23L5/20 |
| 代理公司: | 北京中建聯合知識產權代理事務所(普通合伙) 11004 | 代理人: | 王靈靈 |
| 地址: | 100081 北*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 利用 天然 氨基 單糖 降低 大腸桿菌 耐壓性 方法 | ||
1.一種利用天然氨基單糖降低大腸桿菌耐壓性的方法,其特征在于,包括如下步驟:
步驟一、配制MES緩沖液,調整pH范圍為5~6;
步驟二、用pH為7.4的磷酸鹽緩沖液配制質量濃度為10%的氨基葡萄糖溶液,將其置于35℃~38℃條件下溫和孵育1~3天;
步驟三、在步驟一配制的MES緩沖液中接種大腸桿菌,至大腸桿菌數為106~108logcfu/mL;
步驟四、在步驟三培養的大腸桿菌中加入步驟二溫和孵育后的氨基葡萄糖溶液,至氨基葡萄糖的最終質量濃度為2%,形成樣品溶液;
步驟五、迅速取一定量的步驟四的樣品溶液移入超高壓設備內;
步驟六、對樣品進行超高壓處理,壓力為600MPa,溫度為20℃,時間為9 min或15 min;
步驟七、將步驟六處理后的樣品溶液從超高壓設備內取出;
步驟八、進行后續大腸桿菌的菌落培養和總數檢測。
2.根據權利要求1所述的一種利用天然氨基單糖降低大腸桿菌耐壓性的方法,其特征在于:所述步驟二中,將質量濃度10%的氨基葡萄糖溶液置于37℃條件下溫和孵育48小時。
3.根據權利要求1所述的一種利用天然氨基單糖降低大腸桿菌耐壓性的方法,其特征在于:所述步驟三中,大腸桿菌數為107log cfu/mL。
4.根據權利要求1所述的一種利用天然氨基單糖降低大腸桿菌耐壓性的方法,其特征在于:所述步驟一中,MES緩沖液的pH范圍為5.5。
5.根據權利要求1所述的一種利用天然氨基單糖降低大腸桿菌耐壓性的方法,其特征在于:所述步驟五中,每個樣品溶液量為200μ L 。
6.根據權利要求1所述的一種利用天然氨基單糖降低大腸桿菌耐壓性的方法,其特征在于:所述步驟八中,菌落培養具體包括梯度稀釋、涂板和培養,所用培養基為LB培養基。
7.根據權利要求6所述的一種利用天然氨基單糖降低大腸桿菌耐壓性的方法,其特征在于:所述步驟八中,將平板放置37℃培養箱進行培養24h后,進行菌落計數,計算原始樣品中的大腸桿菌菌落數。
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