[發明專利]鑒別水貂犬瘟熱病毒、水貂細小病毒、水貂阿留申病毒及偽狂犬病毒的四重PCR引物組

有效

• 申請號: 202011467977.6
• 申請日: 2020-12-14
• 公開（公告）號: CN112391501B
• 公開（公告）日: 2023-09-15
• 發明（設計）人: 張海玲;白雪;廉士珍;胡博;張蕾;李偉;張東亮;李虹曄;李雙雙;李紫仟
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院特產研究所
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 馬鑫

本發明公開了一種鑒別水貂犬瘟熱病毒、水貂細小病毒、水貂阿留申病毒及偽狂犬病毒的四重PCR引物組，屬于獸用醫療制品技術領域。使用本發明的引物組可同時檢測水貂犬瘟熱病毒、水貂細小病毒、水貂阿留申病毒及水貂偽狂犬病毒。本發明還公開了含有上述引物組的試劑盒并建立了相關的多重PCR檢測方法。本發明建立的多重PCR檢測方法簡單，檢測速度快且批量大、特異性好、準確性高、重復性好，可以準確、快速、高通量的進行臨床樣本的檢測，也可應用于寵物犬、雪貂及狐貍、貉病毒病的檢測。

技術領域

本發明涉及一種鑒別水貂犬瘟熱病毒、水貂細小病毒、水貂阿留申病毒、偽狂犬病毒的四重PCR引物組，還涉及含有該引物組的試劑盒及其應用，本發明屬于獸用醫療制品技術領域。

背景技術

我國毛皮動物養殖業從上世紀50年代起步，90年代獲得蓬勃發展，如今已成為畜牧業養殖的重要組成部分。目前，我國水貂存欄數可達5000萬只，主要集中在山東、河北、吉林、遼寧、黑龍江、內蒙古等省份地區，并形成了較大的產業鏈。在某些地區水貂等毛皮動物養殖業甚至成為區域經濟的支柱性產業。可見毛皮動物養殖業對推動“三農”經濟發展，促進農村產業結構調整，增加農民就業和收入起到了重要的作用。因此，及時對上述四種疾病進行防控能夠最大限度的減少上述傳染病發生給水貂養殖業帶來的損失，促進水貂養殖業的發展。

水貂犬瘟熱是由副黏病毒科麻疹病毒屬犬瘟熱病毒引起的急性、熱性、高度接觸性傳染病，其主要特征是以侵害黏膜系統為主，出現雙相體溫升高，伴有卡他性肺炎、胃腸炎，偶有神經癥狀，容易繼發其他細菌病毒的混合感染和二次感染，幼貂死亡率可高達80％。帶毒水貂是最危險的傳染源，通過眼及鼻分泌物、唾液、尿、糞便排出病毒，主要經消化道、呼吸道傳染，是水貂養殖業三大疫病之一，俗稱“貂瘟”。

水貂細小病毒性腸炎是由細小病毒科細小病毒屬水貂細小病毒引起的急性、高度接觸性傳染病，是水貂養殖業三大疫病之一。不同年齡和品種的水貂均有易感性，但50～60日齡的仔貂和幼貂最為易感，幼貂的發病率為70％以上，其死亡率可達90％；成年貂的發病率為30％左右，死亡率在30％以下。患病水貂和耐過貂是該病的主要傳染源，通過糞、尿、唾液排毒，經消化道和呼吸道傳染給易感染的健康貂。該病全年都可發生，常呈地方性流行，一旦傳入貂場，如獸醫防疫衛生措施不完善，常常導致該病長期存在和周期性發生。

水貂阿留申病又稱水貂漿細胞增多癥(Plasmacytosis)，是農業部動物疫病病種名錄中三類動物疫病、中國-丹麥進境水貂議定書中的必檢疫病項目，該病由水貂阿留申病毒引起的，它可以感染任何年齡段的水貂，并且病癥呈現出多樣的表現形式。對患急性肺炎的新生仔貂而言，阿留申病毒幾乎可以導致其100％的死亡率；而對成年水貂，該病通常引起水貂的持續感染，并表現為終生病毒血癥、高蛋白血癥、動脈血管炎和由病毒-抗體復合體誘導的腎小球腎炎和肝炎等。

水貂犬瘟熱、水貂細小病毒性腸炎、水貂阿留申病是水貂常見傳染病。其中水貂阿留申病毒感染范圍廣，常呈隱形感染，造成水貂消瘦、皮張毛色不佳，短小不光滑。而水貂細小病毒、犬瘟熱病毒發病率高、死亡率高，對養貂業造成嚴重損失。近年來，從水貂體內又分離出貂源偽狂犬病毒。偽狂犬病是由偽狂犬病毒引起的經濟動物和家畜的一種急性傳染病。其特征是發熱、奇癢、內臟出血、腦脊髓炎等，近年來水貂臨床病例持續增加。

上述四種水貂疾病臨床某些癥狀相似，又容易混淆或者混合感染。臨床鑒別診斷困難，常用單一PCR檢測方法耗時耗力，所以，建立一種同時檢測四種疾病的鑒別診斷方法具有重要的實際意義和推廣前景。

發明內容

本發明的目的之一在于提供一種用于鑒別水貂犬瘟熱病毒、水貂細小病毒、水貂阿留申病毒、貂源偽狂犬病毒的四重PCR引物組。

本發明的目的之二在于提供一種含有上述的四重PCR引物組的試劑盒及其在鑒別水貂犬瘟熱病毒、水貂細小病毒、水貂阿留申病毒、偽狂犬病毒中的應用。

為了達到上述目的，本發明采用了以下技術手段：