[發明專利]一種間皮素嵌合抗原受體外泌體、及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202011460904.4
• 申請日: 2020-12-11
• 公開（公告）號: CN112574953A
• 公開（公告）日: 2021-03-30
• 發明（設計）人: 楊鵬翔;接晶;楊宇民
• 申請（專利權）人: 南通大學
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;A61K35/17;A61K45/06;A61P35/00
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 黃欣

本發明公開了一種靶向間皮素嵌合抗原受體免疫細胞的外泌體及其制備方法和應用，屬于腫瘤免疫技術領域。通過將免疫細胞以特異性的間皮素抗原活化后，產生的外泌體進行進一步的分析、分離、純化、富集，最終得到攜帶CAR的免疫細胞外泌體。本發明的外泌體能用于多種癌癥的治療，如乳腺癌、胰腺癌、卵巢癌等，且這種外泌體具有克服CAR細胞治療的免疫炎癥風暴等不良反應，增強了CAR的組織浸透能力，還具有保存和運輸方便的優勢，為相關疾病的治療提供了新的策略。

技術領域

本發明屬于腫瘤免疫學技術領域，具體涉及一種靶向間皮素的嵌合抗原受體(Chimeric Antigen Receptor，CAR)免疫細胞來源的外泌體、該外泌體的制備方法以及該外泌體在制備腫瘤免疫治療藥物中的用途。

背景技術

腫瘤的傳統治療方法以手術治療、化學治療和放射性治療為主，免疫治療作為新型的治療手段尤為令人關注。免疫治療包括免疫檢查點抗體治療、單克隆抗體治療、腫瘤疫苗和嵌合抗原受體細胞治療等。嵌合型抗原受體修飾免疫細胞已經從腫瘤免疫的臨床前模型快速進入到商品化應用階段。它是將單克隆抗體技術與細胞信號轉導技術結合，通過胞外單鏈抗體可變區片段識別腫瘤表面特異性抗原，繞過抗原提呈和MHC的限制直接攻擊腫瘤細胞。目前，美國 FDA 已批準了Kymriah? (CTL019)、Yescarta 療法應用于急性白血病和淋巴瘤的治療，其靶向治療分化抗原19（cluster of differentiation 19，CD19）陽性的B 細胞白血病和淋巴瘤總緩解率大于80% (June CH, O'Connor RS, Kawalekar OU,Ghassemi S, Milone MC: CAR T cell immunotherapy for human cancer. Science2018, 359(6382):1361-1365；June CH, Sadelain M: Chimeric Antigen ReceptorTherapy. The New England journal of medicine 2018, 379(1):64-73)，顯示出了清除腫瘤細胞的潛力。

間皮素是一種錨定在細胞膜上的糖蛋白，通過激活NF-κB、MAPK和PI3K等信號通路調控腫瘤的生長和轉移。研究表明，間皮素在多種腫瘤組織中異常表達，包括乳腺癌、胰腺癌、卵巢癌等(Morello A, Sadelain M, Adusumilli PS: Mesothelin-Targeted CARs:Driving T Cells to Solid Tumors. Cancer discovery 2016, 6(2):133-146；Rafiq S,Yeku OO, Jackson HJ, Purdon TJ, van Leeuwen DG, Drakes DJ, Song M, Miele MM,Li Z, Wang P et al: Targeted delivery of a PD-1-blocking scFv by CAR-T cellsenhances anti-tumor efficacy in vivo. Nature biotechnology 2018, 36(9):847-856；Sackstein R, Schatton T, Barthel SR: T-lymphocyte homing: anunderappreciated yet critical hurdle for successful cancer immunotherapy.Laboratory investigation; a journal of technical methods and pathology 2017,97(6):669-697)，且與不良預后相關。因此，間皮素是一種非常有希望的治療靶點。