[發明專利]經移植前暴露于死亡配體的造血祖細胞的活化

在審

• 申請號: 202011460782.9
• 申請日: 2014-10-07
• 公開（公告）號: CN112608897A
• 公開（公告）日: 2021-04-06
• 發明（設計）人: S·亞科尼
• 申請（專利權）人: 塞萊克特生物療法有限公司
• 主分類號: C12N5/0789
• 分類號: C12N5/0789;A61K35/51;A61K35/28;A61P35/00;A61P37/02
• 代理公司: 北京派特恩知識產權代理有限公司 11270
• 代理人: 王子曄;陳萬青

本發明涉及通過在移植之前，使細胞暴露于TNF超家族的配體來增強造血干細胞和造血祖細胞的植入以及改善造血干細胞和造血祖細胞的移植結果的方法。本發明還提供了用于移植的，根據本發明的方法活化的造血干細胞和造血祖細胞的群。

本申請是申請日為2014年10月7日，申請號為201480056068.X，發明名稱為“經移植前暴露于死亡配體的造血祖細胞的活化”的分案申請。

背景技術

造血干細胞和造血祖細胞移植是腫瘤學中的常規療法，其在各種耐放射化療的惡性腫瘤中都具有治療能力。移植程序的改進和逐步推進，開啟了造血移植在非腫瘤疾病中的廣泛實施，其中非腫瘤疾病包括先天性缺陷、先天性和獲得性免疫缺陷綜合征、免疫力異常、自身免疫性疾病，以及對器官和組織移植物的耐受性的誘導。

TNF家族包括19種已知的受體/配體相互作用，它們在誘導體細胞凋亡中具有相同的活性。

在使用鼠科和人類細胞的應力造血和移植模型中所進行的研究，對腫瘤壞死因子(TNF)家族受體作為細胞凋亡和刺激的雙重介質的作用[1-4]，取得了有爭議性的證據和解釋。一方面，傳統觀念主要認為這些受體起到細胞凋亡(細胞發育的少數不可逆事件之一)介質的作用。因此，認為Fas/FasL的相互作用是使造血祖細胞發育的負調節因子，類似于在分化末期對克隆擴增進行抑制[5-7]。這一觀念是基于如下數據，該數據顯示出Fas受體在體外抑制造血祖細胞的功能[8,9]，阻遏克隆形成活性[10,11]，以及損害免疫低下的小鼠[12,13]和人類[11]中的人類細胞植入。

有人提出，祖細胞免于發生細胞凋亡是歸因于，轉導細胞凋亡和抑制信號的TNF家族受體的低水平表達。

另一方面，在歸巢且接種到受體骨髓內之后不久，就在供體細胞中觀察到幾種TNF家族受體發生劇烈上調。

如WO2007/138597中所記載的，造血祖細胞對細胞凋亡的抗性在移植環境中具有幾種重要意義。一方面，WO2007/138597提出作為基于表型進行選擇的替代方式，基于功能特性，使用凋亡挑戰來富集用于移植的祖細胞。該有效且可靠的選擇程序是簡單且低廉的，并且在供體移植物中包括了表達低水平或不表達諸如CD34和CD133標記物的祖細胞。此外，基于細胞凋亡的細胞制劑具有以下明顯優勢：消除了移植物抗宿主(G_VHD)的效應物和自身反應性T細胞，以及來自供體移植物的惡性細胞[33,34]。

本發明人早先曾表明，TNF家族受體在體外對造血細胞功能的負面影響僅限于經細胞因子刺激的骨髓和UCB細胞[8-20,23,27]，而且通過去除細胞因子進一步加劇了該負面影響[35]。在與逐漸喪失植入潛能相關的長期離體培養期間，表達Fas的CD34⁺祖細胞部分對自發性細胞凋亡顯示出過度敏感性[12,13]，然而，這種現象與Fas受體交聯無關[28,31]。已表明，移植后祖細胞在體內保持對細胞凋亡的固有抗性，從而使對細胞凋亡不敏感的祖細胞優先植入到被搞糟的骨髓環境中[28]，其中被搞糟的骨髓環境是由移植前調節所造成的損傷導致的。祖細胞的這種特性使得它們成為免疫細胞的有效替代物，用于進行免疫調節，以減輕體內介導排斥反應的宿主抗移植物(H_VG)的同種免疫應答，這是通過FasL膜蛋白的異位表達來實現的[36,37]。

發明內容