[發明專利]同時檢測甲型流感病毒、乙型流感病毒及呼吸道合胞病毒的試劑盒

在審

• 申請號: 202011460072.6
• 申請日: 2020-12-11
• 公開（公告）號: CN112458212A
• 公開（公告）日: 2021-03-09
• 發明（設計）人: 李進福;高利飛;蘭定云;麥艷娜;李振紅;王瑋;付光宇
• 申請（專利權）人: 鄭州安圖生物工程股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 溫可睿

1.引物探針組合，其包括：

甲型流感病毒的正向引物，其核酸序列如SEQ ID NO:1所示；

甲型流感病毒的反向引物，其核酸序列如SEQ ID NO:2所示；

甲型流感病毒的探針，其核酸序列如SEQ ID NO:3所示；

乙型流感病毒的正向引物，其核酸序列如SEQ ID NO:4所示；

乙型流感病毒的反向引物，其核酸序列如SEQ ID NO:5所示；

乙型流感病毒的探針，其核酸序列如SEQ ID NO:6所示；

呼吸道合胞病毒的正向引物，其核酸序列如SEQ ID NO:7所示；

呼吸道合胞病毒的反向引物1，其核酸序列如SEQ ID NO:8所示；

呼吸道合胞病毒的反向引物2，其核酸序列如SEQ ID NO:9所示；

呼吸道合胞病毒的探針，其核酸序列如SEQ ID NO:10所示。

2.同時檢測檢測甲型流感病毒、乙型流感病毒及呼吸道合胞病毒的試劑盒，其特征在于，包括含有權利要求1所述的引物探針組合的反應液。

3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述反應液中還包括內標的引物和探針；所述內標的序列為SEQ ID NO:17；

內標的正向引物，其核酸序列如SEQ ID NO:11所示；

內標的反向引物，其核酸序列如SEQ ID NO:12所示；

內標的探針，其核酸序列如SEQ ID NO:13所示。

4.根據權利要求2或3所述的試劑盒，其特征在于，

如SEQ ID NO.3所示探針的5’端連接FAM熒光基團；

如SEQ ID NO.6所示探針的5’端連接ROX熒光基團；

如SEQ ID NO.10所示探針的5’端連接CY5熒光基團；

如SEQ ID NO.13所示探針的5’端連接HEX熒光基團。

5.根據權利要求2或3所述的試劑盒，其特征在于，所述反應液中還包括：Tricine、KOAc、Tween20、DMSO、dNTPs、Tth酶、醋酸錳和水。

6.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，還包括陰性質控品和陽性質控品；所述陰性質控品為無菌水；所述陽性質控品為人工合成的濃度1×10⁵Copies/ml的裝甲RNA。

7.非診斷目的同時檢測甲型流感病毒、乙型流感病毒及呼吸道合胞病毒的方法，其特征在于，以權利要求2～8任一項所述的試劑盒對樣品進行檢測，根據熒光信號判斷樣品是否存在甲型流感病毒、乙型流感病毒或呼吸道合胞病毒。

8.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述樣品為咽拭子、鼻拭子或環境樣品；擴增的體系包括：25μL反應液和5μL樣品提取物；

所述反應液包括：

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述擴增的程序包括：