[發明專利]一種組合物及其在檢測脂蛋白相關磷脂酶A2活性中的應用

有效

• 申請號: 202011458579.8
• 申請日: 2020-12-11
• 公開（公告）號: CN112575057B
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發明（設計）人: 陳小茹;吳傳俠;吳向東;周博
• 申請（專利權）人: 深圳上泰生物工程有限公司
• 主分類號: C12Q1/44
• 分類號: C12Q1/44
• 代理公司: 深圳鼎合誠知識產權代理有限公司 44281
• 代理人: 周建軍;郭燕

1.一種組合物，其特征在于，所述組合物含有底物、穩定劑，所述穩定劑為冠醚類化合物以及葡聚糖類化合物，所述冠醚類化合物選自18-冠醚-6，所述葡聚糖類化合物選自葡聚糖40，所述冠醚類化合物在所述組合物中的濃度為0.05 wt %，所述葡聚糖類化合物在所述組合物中的濃度為0.1 wt%，所述底物可結合至脂蛋白相關磷脂酶A2，結合至所述脂蛋白相關磷脂酶A2的底物會發生分解，所述底物的sn-2位帶有4-硝基苯酚基團，所述脂蛋白相關磷脂酶A2與所述底物結合后，所述底物發生水解，釋放出帶有4-硝基苯酚基團的物質，該物質在溶液中降解，生成對硝基苯酚。

2.如權利要求1所述的組合物，其特征在于，所述底物為血小板激活因子類似物；

所述底物選自1-十四酰基-2-4-對硝基苯酚丁二酸酐-3-磷脂酰乙醇胺、1-十四酰基-2-4-對硝基苯酚丁二酸酐-3-磷脂酰甘油、1-十四酰基-2-4-對硝基苯酚丁二酸酐-3-磷脂酰膽酰中的至少一種；

所述底物在所述組合物中的濃度為0.001-0.5 wt%；

所述組合物還含有助溶劑；

所述助溶劑選自有機溶劑；

所述助溶劑選自乙腈、乙醇、甘油、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺中的至少一種；

所述助溶劑在所述組合物中的濃度為2-10 wt %；

所述組合物還含有有機酸、第二抑制劑中的至少一種；

所述有機酸選自檸檬酸、乙酸、草酸、羥基乙酸、氨基磺酸、丁二酸、苯甲酸中的至少一種；

所述有機酸在所述組合物中的濃度為5-100 mmol/L；

所述第二抑制劑選自3-[3-（膽酰胺丙基）二甲氨基]丙磺酸內鹽、3-[(3-膽胺丙基)二甲基氨基]-2-羥基-1-丙磺酸內鹽、正壬烷磺酸鈉、戊烷磺酸鈉、己烷磺酸鈉、1-庚烷磺酸鈉中的至少一種；

所述第二抑制劑在所述組合物中的濃度為2-50 mmol/L；

所述組合物的pH為3.0-7.0。

3.一種試劑組合，包括權利要求1-2任意一項所述的組合物。

4.如權利要求3所述的試劑組合，包括第一試劑、第二試劑，所述第二試劑含有權利要求1-2任意一項所述組合物；

所述第一試劑含有緩沖劑、螯合劑、第一抑制劑、鹽中的至少一種；

所述緩沖劑選自磷酸鹽、3-嗎啉丙磺酸、3-(N-嗎啉基)-2-羥基丙磺酸、4-羥乙基哌嗪乙磺酸、三羥甲基氨基甲烷中的至少一種；

所述緩沖劑在所述第一試劑中的濃度為50-300 mmol/L；

所述螯合劑選自氨基三亞甲基膦酸、乙二醇雙(2-氨基乙基醚)四乙酸、乙二胺四亞甲基膦酸、乙二胺四乙酸中的至少一種；

所述螯合劑在所述第一試劑中的濃度為5-50 mmol/L；

所述第一抑制劑選自3-[3-（膽酰胺丙基）二甲氨基]丙磺酸內鹽、3-[(3-膽胺丙基)二甲基氨基]-2-羥基-1-丙磺酸內鹽、正壬烷磺酸鈉、戊烷磺酸鈉、己烷磺酸鈉、1-庚烷磺酸鈉中的至少一種；

所述第一抑制劑在所述第一試劑中的濃度為1-50 mmol/L；

所述鹽選自氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、硫酸銅中的至少一種；

所述鹽在所述第一試劑中的濃度為50-500 mmol/L；

所述第一試劑的pH為7.0-9.0。

5.一種試劑盒，其特征在于，包括權利要求1-2任意一項所述組合物或權利要求3-4任意一項所述試劑組合。

6.如權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權利要求4中所述第一試劑、第二試劑時，所述第一試劑、第二試劑獨立分裝于不同的容器中。

7.如權利要求1-2任意一項所述組合物，或權利要求3-4任意一項所述試劑組合，或權利要求5-6任意一項所述試劑盒在測定脂蛋白相關磷脂酶A2活性中的非診斷治療目的的應用。

8.如權利要求7所述的應用，其特征在于，包括將待測樣品、權利要求4中所述第一試劑混合后，加入權利要求4中所述第二試劑，得到可用于測定脂蛋白相關磷脂酶A2活性的混合液；

還包括對所述混合液的吸光度進行測定，計算得到待測樣品中的脂蛋白相關磷脂酶A2活性；

通過計算所述混合液在405nm波長下吸光度的變化率，計算得到待測樣品中的脂蛋白相關磷脂酶A2活性；

所述變化率是指混合液在第6.5到10分鐘內的吸光度變化率。