[發明專利]熒光相關光譜（FCS）在植物細胞核中的應用方法

在審

• 申請號: 202011457962.1
• 申請日: 2020-12-10
• 公開（公告）號: CN112697759A
• 公開（公告）日: 2021-04-23
• 發明（設計）人: 崔亞寧
• 申請（專利權）人: 北京林業大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N1/30
• 代理公司: 北京化育知識產權代理有限公司 11833
• 代理人: 涂琪順

1.熒光相關光譜(FCS)在植物細胞核中的應用方法，包括步驟一，熒光調制；步驟二，植物加工；步驟三，顯微成像；步驟四，細胞分析；步驟五，清洗處理；其特征在于：

其中在上述步驟一中，熒光調制包括以下步驟：

1)人工根據植物細胞選擇合適的熒光基團原料；

2)將選擇的熒光基團原料與水混合，并將其震蕩靜置存儲；

其中在上述步驟二中，植物加工包括以下步驟：

1)人工準備載玻片，并將載玻片中央滴入清水，隨后使用鑷子將植物表皮撕下，放入載玻片中央；

2)滴加熒光染料，將熒光染料滴在載玻片另一側，用吸水紙吸引熒光染料，使熒光染料浸潤植物表皮；

其中在上述步驟三中，顯微成像包括以下步驟：

1)人工將步驟一2)中混合物倒入探針中，通過探針將混合物滴加在植物表皮頂部，并蓋上蓋玻片；

2)將載玻片放入顯微鏡中，采用FCS對細胞質結構和細胞核進行探測；

3)記錄觀測的細胞質結構和細胞核，并通過顯微鏡拍照，繪制處細胞質結構和細胞核位置圖片；

其中在上述步驟四中，細胞分析包括以下步驟：

1)人工在載玻片區域投射激發光，細胞質結構和細胞核激發熒光基團，由時間分辨單光子探測儀記錄細胞質結構和細胞核熒光基團的光子發生事件，并計算出熒光相關光譜；

2)對比載玻液濃度，細胞質結構和細胞核結構移動的遷移率，測定細胞質結構和細胞核內動力學，繪制表格，存儲對比；

其中在上述步驟五中，熒光相關光譜測試完成后，取下載玻片，用鑷子取出植物表皮，清洗載玻片。

2.根據權利要求1所述的熒光相關光譜(FCS)在植物細胞核中的應用方法，其特征在于：所述步驟一2)中熒光基團原料與水混合比例為2∶1。

3.根據權利要求1所述的熒光相關光譜(FCS)在植物細胞核中的應用方法，其特征在于：所述步驟二1)中載玻片使用前需要使用紗布進行擦拭。

4.根據權利要求1所述的熒光相關光譜(FCS)在植物細胞核中的應用方法，其特征在于：所述步驟三1)中蓋玻片需要提前清洗。

5.根據權利要求1所述的熒光相關光譜(FCS)在植物細胞核中的應用方法，其特征在于：所述步驟四1)中激發光為紫色激光。

6.根據權利要求1所述的熒光相關光譜(FCS)在植物細胞核中的應用方法，其特征在于：所述步驟五中清洗后擦干存放在陰涼地。