[發明專利]一種曲氟尿苷與其異構體的HPLC分離方法

有效

• 申請號: 202011456737.6
• 申請日: 2020-12-10
• 公開（公告）號: CN112362791B
• 公開（公告）日: 2023-06-06
• 發明（設計）人: 徐昊;李泉妙;王淑娟;康威
• 申請（專利權）人: 國藥一心制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 王洋

1.一種曲氟尿苷與其異構體的HPLC分離檢測方法，其特征在于，包括：

A）將曲氟尿苷及其異構體在衍生化試劑、溶劑和縛酸劑的存在下分別進行衍生化，得到曲氟尿苷衍生化樣品和曲氟尿苷異構體衍生化樣品；所述曲氟尿苷異構體是指曲氟尿苷呋喃糖環1位的手性異構體;?所述衍生化試劑為苯甲酰氯；所述溶劑為二氯甲烷；所述縛酸劑為三乙胺；所述衍生化的溫度為30℃~50℃，衍生化的時間為30~50min；

B）采用高效液相色譜對曲氟尿苷衍生化樣品和曲氟尿苷異構體衍生化樣品進行檢測，采用面積歸一化法測定含量；

色譜參數為：

色譜柱為Waters?Symmetry?C18，5μm，4.6?×?150?mm或Inertsil?ODS-3，4.6×150mm5μm；柱溫為40℃；檢測波長為240nm，流動相流速為0.8?mL/min?~1.2mL/min，所述流動相為梯度洗脫；

流動相A為7.8g/L的磷酸二氫鈉溶液；流動相B為乙腈;?流動相流速為1.0mL/min；進樣量為10μL；

所述梯度洗脫具體為：

0~10min?流動相A為40%，流動相B為60%；

10~20min?流動相A為40%~20%，流動相B為60~80%；

20~21min?流動相A為20%~40%，流動相B為80%~60%；

21~30min?流動相A為40%，流動相B為60%。

2.根據權利要求1所述的分離檢測方法，其特征在于，步驟A）所述衍生化后還包括加入1mol/L稀鹽酸猝滅，經萃取后，濃縮，即得。

3.根據權利要求1所述的分離檢測方法，其特征在于，曲氟尿苷衍生化樣品與曲氟尿苷異構體衍生化樣品分離度為2以上。