[發明專利]參附注射液中多成分的檢測方法

在審

• 申請號: 202011451592.0
• 申請日: 2020-12-10
• 公開（公告）號: CN112461976A
• 公開（公告）日: 2021-03-09
• 發明（設計）人: 侯新蓮;吳建國;袁海英;蔡幫軍;史琳莉
• 申請（專利權）人: 華潤三九（雅安）藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/60;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 陳秋夢

本發明涉及藥物分析檢測技術領域，具體而言，涉及參附注射液中多成分的檢測方法。該檢測方法包括采用高效液相色譜?質譜檢測參附注射液中的皂苷類成分和生物堿類成分，且質譜的掃描方式為正負離子掃描。通過本發明實施例提供的方法能夠同時快速以及準確地檢測參附注射液中皂苷類成分和生物堿類成分的含量，能夠實現參附注射液中多成分的檢測，簡化了參附注射液的檢測方法。

技術領域

本發明涉及藥物分析檢測技術領域，具體而言，涉及參附注射液中多成分的檢測方法。

背景技術

參附注射液由紅參、附片處方組成，主要有效成分為人參皂苷和生物堿。目前，參附注射液國家標準中僅有生物堿的鑒別和限量檢查；人參皂苷含量包括Rg1、Re和人參總皂苷含量檢測，四個質量控制項目采用了多種不同的檢測方法。具體地，生物堿的鑒別采用薄層色譜顯色檢測，生物堿的限量以及人參皂苷Rg1和Re的含量檢測采用液相分析，人參總皂苷含量檢測采用紫外可見光檢測。采用多種不同的檢測方法耗費大量的檢驗時間以及試藥試劑，說明現行檢測方法即不高效也不環保，且不能準確定量檢測。而現有技術中對于生物堿以及人參皂苷類成分的檢測均為單組分檢測，不能滿足一個方法同時快速測定兩類組成的要求，更不能檢測兩類成分中更具體地成分的含量。

鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的目的在于提供參附注射液中多成分的檢測方法。通過本發明實施例提供的方法能夠同時快速以及準確地檢測參附注射液中皂苷類成分和生物堿類成分的含量，能夠實現參附注射液中多成分的檢測，簡化了參附注射液的檢測方法。

本發明是這樣實現的：

第一方面，本發明提供一種參附注射液中多成分的檢測方法，包括采用高效液相色譜-質譜檢測參附注射液中的皂苷類成分和生物堿類成分，且質譜的掃描方式為正負離子掃描。

在可選的實施方式中，高效液相色譜的條件為：色譜柱為SPE柱和C18柱；流動相A為8-12mmol/L甲酸銨溶液，流動相B為質量濃度為0.08-0.12％的甲酸乙腈溶液，流動相C為8-12mmol/L甲酸銨溶液和乙腈形成的質量濃度為18-25％的混合溶液；流速為0.5-1.0mL/min，柱溫為30-50℃。

需要說明的是，流動相C是將分析純或者純度達到99.9％的乙腈與濃度為8-12mmol/L甲酸銨溶液混合形成的混合液，且該混合液中乙腈的質量濃度為18-25％。

在可選的實施方式中，高效液相色譜的操作過程包括：對SPE柱上樣，而后對SPE柱進行除雜；

優選地，除雜包括：0-1min:流動相C對SPE柱進行除雜；

高效液相色譜的操作過程包括：對SPE柱進行除雜后，對SPE柱和C18柱進行洗脫；

高效液相色譜的洗脫過程包括：1-4min:流動相A80％，流動相B20％；4-7min:流動相A 60％→80％，流動相B40％→20％；7-11min：流動相A60％，流動相B40％；11-16min:流動相A60％→40％，流動相B40％→60％；16-19min：流動相A40％，流動相B60％，19-21min：流動相A40％→80％，流動相B60％→20％。

本發明實施例同時采用SPE柱和C18柱，但是僅SPE柱含有樣品，即在SPE柱內進行上樣；而C18柱未含待檢測的樣品；樣品中除了含有需要檢測的人參皂苷以及生物堿等小分子，還有多糖等大分子，而大分子物質會影響上述小分子的檢測，因此，需要去除上述大分子的影響。具體地，利用流動相C僅僅對SPE柱進行洗脫(此時為開始洗脫的1min內)，使得糖類等極性大的分子被流動相C溶解/置換除去，使得SPE柱中的樣品內為待分析檢測的生物堿和人參皂苷等小分子，能夠更為準確地檢測人參皂苷以及生物堿中更具體地物質。