[發(fā)明專利]一種檢測巴克球中苦精的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011432118.3
• 申請日: 2020-12-07
• 公開（公告）號: CN112526037A
• 公開（公告）日: 2021-03-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 邵曉林;項林敏;王旭光;周建峰;張碧宇
• 申請（專利權(quán)）人: 溫州市質(zhì)量技術(shù)檢測科學(xué)研究院
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 北京祺和祺知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11501
• 代理人: 鄭鵬坤

1.一種檢測巴克球中苦精的方法，其特征在于：包括以下步驟：

(1)提取：稱取巴克球樣品于燒杯A中，加入甲醇浸沒巴克球樣品，然后將燒杯A置于超聲波發(fā)生器中超聲30min，轉(zhuǎn)移上清液至燒杯B中，上清液由氮吹儀氮吹至干得濃縮物；

(2)凈化：加入1mL甲醇以將濃縮物溶解，過濾后進(jìn)行液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)分析；

(3)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配置：取苦精標(biāo)準(zhǔn)品溶于甲醇，制成一系列濃度的苦精標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，所有標(biāo)準(zhǔn)工作溶液均置于冰箱中4℃保存?zhèn)溆茫?/p>

(4)測定和結(jié)果計算：

LC-MS/MS的液相色譜分析條件為：填料為C₁₈的色譜柱，柱溫為30℃；進(jìn)樣體積為2μL；流動相為：甲醇和乙酸銨水，梯度洗脫；

質(zhì)譜條件為：電噴霧質(zhì)譜檢測；電離源極性為正模式；檢測方式為多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)；離子噴霧電壓為4000v；霧化氣壓力為45psi；霧化氣為氮氣；干燥器溫度為325℃；干燥氣流速為10L/min；

將步驟(3)中的各濃度梯度的苦精標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行LC-MS/MS測定，并根據(jù)檢測結(jié)果繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；在相同條件下，將步驟(2)中凈化后的樣品液注入LC-MS/MS進(jìn)行測定，并將檢測結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)曲線對照，計算出樣品中苦精的含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測巴克球中苦精的方法，其特征在于：所述步驟(2)中的過濾為采用0.22μm的濾膜進(jìn)行過濾。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測巴克球中苦精的方法，其特征在于：所述步驟(3)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配置具體為：

稱取苦精標(biāo)準(zhǔn)品0.0010g于10mL容量瓶中，甲醇定容，得到100μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液；

苦精中間液(10μg/mL)：準(zhǔn)確吸取1.0mL苦精標(biāo)準(zhǔn)儲備液到10mL容量瓶中得到10μg/mL；

苦精標(biāo)準(zhǔn)系列工作液：準(zhǔn)確移取苦精標(biāo)準(zhǔn)中間液(10μg/mL)，用甲醇逐級稀釋，配制成濃度為20、50、100、200、300ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列濃度，所有標(biāo)準(zhǔn)溶液均置于冰箱中4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測巴克球中苦精的方法，其特征在于：所述步驟(4)中液相色譜分析梯度洗脫程序為：

時間/min	流動相A(甲醇)	流動相B(乙酸銨水)
0	5	95
1	50	50
5	95	5
6	95	5