[發(fā)明專利]一種用于缺血性心臟病基因靶向治療的載基因顯影微泡及其制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011423454.1
• 申請(qǐng)日: 2020-12-08
• 公開（公告）號(hào): CN112546245A
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田海;孫露;陳巍;黃明莉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K49/22
• 分類號(hào): A61K49/22;A61K48/00;A61K38/48;A61K38/50;A61K41/00;A61P9/10
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11139
• 代理人: 馬鑫

本發(fā)明公開了一種用于缺血性心臟病基因靶向治療的載基因顯影微泡及其制備方法。所述的載基因顯影微泡包括陽(yáng)離子顯影微泡以及分散于顯影微泡外殼表面的治療基因質(zhì)粒，其中，所述的顯影微泡具有正電性的脂質(zhì)雙分子層外殼以及包裹在外殼內(nèi)部的生物惰性氣體，所述的治療基因質(zhì)粒包括含有基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子?3(TIMP?3)和沉默信息調(diào)節(jié)因子3(SIRT3)基因的質(zhì)粒。該基因微泡制劑在超聲作用下集中空化并釋放目的基因，快速對(duì)靶器官進(jìn)行基因轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染效率高、靶向性強(qiáng)、安全無(wú)創(chuàng)、可反復(fù)操作。另外，該基因顯影微泡可以同時(shí)在超聲下顯影，對(duì)缺血心肌的灌注情況進(jìn)行檢測(cè)和診斷，在治療的同時(shí)能夠準(zhǔn)確的評(píng)估，使治療更精確。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種用于缺血性心臟病基因靶向治療的載基因顯影微泡及其制備方法。本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

世界范圍內(nèi)每年大概有近2000萬(wàn)人死于心血管疾病，而這個(gè)數(shù)字至2030年將會(huì)迅速增長(zhǎng)至2630萬(wàn)人^[1-2]。隨著生活水平的提高以及生活方式的改變，近40年來(lái)，我國(guó)缺血性心臟病的發(fā)病率及死亡率亦呈逐年上升態(tài)勢(shì)，在所有心臟疾病中居首位。缺血性心臟病可引發(fā)心臟功能細(xì)胞的不可逆性壞死、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、心肌間質(zhì)重構(gòu)等一系列的內(nèi)在變化，最終導(dǎo)致難以控制的心力衰竭甚至死亡^[3-4]。目前，國(guó)際上針對(duì)缺血性心臟疾病的標(biāo)準(zhǔn)臨床治療手段包括藥物溶栓治療、介入支架及冠脈搭橋手術(shù)等，這些治療方式均以重建缺血區(qū)域的血運(yùn)為主要目的稱為急診冠脈再血管化(CR)，雖然能夠通過(guò)恢復(fù)殘存心肌供血、改善心臟功能達(dá)到治療的效果，然而并不能徹底阻止或者逆轉(zhuǎn)缺血對(duì)心臟組織造成的病理?yè)p害，所以仍有相當(dāng)一部分患者在治療的近期，尤其是遠(yuǎn)期出現(xiàn)心力衰竭影響患者的生存質(zhì)量，甚至造成死亡。近20年來(lái)缺血性心臟病患者的死亡率始終沒有明顯下降^[5-8]。因此，如何在恢復(fù)血供的同時(shí)，針對(duì)缺血損傷的病理進(jìn)程及病理?yè)p害進(jìn)行精準(zhǔn)的調(diào)控，以有效降低急診CR治療后心衰的發(fā)生率，改善患者的生存質(zhì)量并降低死亡率，是目前心血管病醫(yī)生迫切希望解決的一個(gè)難題。

缺血性心臟病會(huì)造成心臟功能細(xì)胞的調(diào)亡、炎癥反應(yīng)、心肌間質(zhì)重構(gòu)等一系列病理生理改變，造成心肌纖維化、瘢痕形成等病理?yè)p傷，影響心臟的舒縮功能，最終造成心力衰竭甚至死亡^[3-4]。而對(duì)缺血心肌給予急診CR治療后，上述的病理改變并不會(huì)完全逆轉(zhuǎn)。有文獻(xiàn)顯示，缺血心肌在急診CR后會(huì)在一定程度上繼續(xù)存在心臟細(xì)胞凋亡、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、炎癥因子釋放、基質(zhì)金屬蛋白酶激活和膠原組織增生等現(xiàn)象^[9-12]，其中心臟功能細(xì)胞的繼續(xù)喪失會(huì)直接導(dǎo)致心臟功能單位的減少，同時(shí)會(huì)進(jìn)一步誘導(dǎo)炎性因子釋放，加重周圍心肌細(xì)胞的進(jìn)一步損傷及間質(zhì)的纖維化；另一方面，炎癥反應(yīng)、基質(zhì)金屬蛋白酶激活和膠原組織增生等會(huì)造成不良心室間質(zhì)重構(gòu)，最終可導(dǎo)致纖維瘢痕形成和心功能下降。而在目前的臨床治療過(guò)程中，在急診CR后并沒有針對(duì)上述病理改變進(jìn)行精準(zhǔn)、有效的后續(xù)治療手段，從而導(dǎo)致急診CR治療后近期、尤其是遠(yuǎn)期心衰發(fā)生率高、治療效果差。

應(yīng)用基因治療以達(dá)到對(duì)缺血性心臟病的精準(zhǔn)治療一直是心血管研究領(lǐng)域力求實(shí)現(xiàn)突破性進(jìn)展的努力方向，其在實(shí)驗(yàn)室階段的治療效果已經(jīng)在大量的體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)中得到強(qiáng)有力的印證。本發(fā)明人既往通過(guò)多項(xiàng)研究證實(shí)以骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞為載體，應(yīng)用基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-3(TIMP-3)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)和沉默信息調(diào)節(jié)因子3(SIRT3)等基因?qū)θ毖孕呐K疾病進(jìn)行基因治療能夠在一定程度上逆轉(zhuǎn)缺血組織的相應(yīng)病理改變，改善心臟功能，最終達(dá)到對(duì)缺血性心臟病的有效治療^[13-17]。相較于體外細(xì)胞基因轉(zhuǎn)染的可控性，體內(nèi)基因轉(zhuǎn)染因其在轉(zhuǎn)染效率以及在安全性、有效性、靶向性等多方面存在較多制約因素而無(wú)法有效開展，限制了其臨床的應(yīng)用。