[發明專利]一種水產品中磺胺類抗生素及其乙酰化代謝物的檢測方法

在審

• 申請號: 202011422748.2
• 申請日: 2020-12-08
• 公開（公告）號: CN112526024A
• 公開（公告）日: 2021-03-19
• 發明（設計）人: 閆振華;章夏冬;陸光華
• 申請（專利權）人: 河海大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 張超

本發明公開了一種水產品中磺胺類抗生素及其乙酰化代謝物的檢測方法，包括以下步驟：將水產品的樣品放入冷凍干燥儀中低溫干燥，得到干燥樣品；將上述干燥樣品置于50mL圓底離心管中，依次添加提取液和萃取液，渦旋混勻，再與第一凈化鹽充分混勻，進行離心取得一次上清液；再將一次上清液轉移至15mL尖底離心管中，與第二凈化鹽充分混勻，進行離心取得二次上清液，然后濃縮干燥，再用復溶液進行復溶，經針式過濾器過濾得待檢測的樣品溶液。本發明首先能同時對多種磺胺類抗生素及其乙酰化代謝產物進行前處理，前處理完成后即可使用常規技術進行樣品的色譜或質譜分析，可減少3/4有機試劑的消耗，更綠色、環保、清潔。

技術領域

本發明涉及抗生素檢測領域，具體涉及一種水產品中磺胺類抗生素及其乙酰化代謝物的檢測方法。

背景技術

磺胺類藥物是一種人工合成抗菌藥物，抗菌譜廣，價格便宜，廣泛應用于醫療業，水產養殖業，是一種用于抗感染的人畜共用藥。然而，磺胺類藥物在人體及動物體內并不能完全吸收，大部分以原型及代謝物隨尿液及糞便排出體外。例如，磺胺類藥物在動物體內大約有50％以母體形式排出體外，大約有30％以乙?；x物排出體外。這些磺胺類藥物及其代謝物能直接進入污水處理廠，但是，研究表明磺胺類在污水處理廠不能完全去除，并隨污水出水排入地表水。此外，磺胺類代謝物在污水處理過程可能會重新轉變為其母體化合物。

已有研究表明有些代謝物的毒性甚至會比其母體化合物更強，例如乙酰化的磺胺藥物一般比其母體化合物的溶解度低，容易析出結晶，產生結晶尿，增加腎毒性。然而，到目前為止，大部分研究者主要的工作還是集中在研究母體化合物，對其代謝物的研究較少，特別是國內關于磺胺的乙?；x物在環境中的研究較少。

樣品的前處理是殘留檢測的重要步驟，也是最消耗時間和試劑的步驟。但是現有水產品中磺胺類藥物的殘留檢測的前處理大部分只能做單種藥物殘留的前處理，效率低，需要很長的時間進行處理，有機試劑的消耗量大，成本較高。因此，迫切需要建立一種快速高效的檢測磺胺類抗生素及其乙?；x物的方法。

發明內容

發明目的：本發明目的是提供一種水產品中磺胺類抗生素及其乙?；x物的檢測方法，解決了現有水產品中磺胺類藥物的殘留檢測前處理大部分只能做單種藥物殘留的前處理，效率低，需要很長的時間進行處理，而且有機試劑的消耗量大，成本較高的問題。

技術方案：本發明一種水產品中磺胺類抗生素及其乙酰化代謝物的檢測方法，包括以下步驟：

(1)預處理：將水產品的樣品放入冷凍干燥儀中低溫干燥，得到干燥樣品；

(2)樣品處理：將上述干燥樣品置于50mL圓底離心管中，依次添加提取液和萃取液，渦旋混勻，再與第一凈化鹽充分混勻，進行離心取得一次上清液；再將一次上清液轉移至15mL尖底離心管中，與第二凈化鹽充分混勻，進行離心取得二次上清液，然后濃縮干燥，再用復溶液進行復溶，經針式過濾器過濾得待檢測的樣品溶液；

(3)樣品檢測：通過高效液相色譜儀對過濾后的待檢測的樣品溶液進行磺胺類抗生素及其乙酰化代謝物的檢測。

進一步的，所述步驟(2)中提取液為超純水。

進一步的，所述步驟(2)中萃取液含5％氨水的乙腈。

進一步的，所述步驟(2)中第一凈化鹽為氯化鈉和硫酸鎂；第二凈化鹽為C18和硫酸鎂。

進一步的，所述步驟(2)中復溶液為甲醇。

進一步的，所述步驟(2)中針式過濾器為孔徑0.22微米的有機相過濾器。

進一步的，所述步驟(2)中二次上清液濃縮干燥具體為：將二次上清液置于10mL玻璃試管中，45℃下旋蒸或氮氣吹干。