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[發明專利]毛果楊HDA909基因在提高植物抗真菌能力中的應用有效

專利信息
申請號: 202011409624.0 申請日: 2020-12-04
公開(公告)號: CN112430602B 公開(公告)日: 2022-05-13
發明(設計)人: 馬旭俊;李淑娟;程玉祥 申請(專利權)人: 東北林業大學
主分類號: C12N15/29 分類號: C12N15/29;C12N15/82;C12N15/66;C07K14/415;A01H5/12;A01H6/00
代理公司: 北京盛詢知識產權代理有限公司 11901 代理人: 陳巍
地址: 150040 黑龍*** 國省代碼: 黑龍江;23
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摘要:
搜索關鍵詞: 毛果 hda909 基因 提高 植物 真菌 能力 中的 應用
【權利要求書】:

1.毛果楊HDA909基因在提高植物抗鏈格孢菌(Alternar alternata)能力中的應用,其特征在于,所述的毛果楊HDA909基因序列如SEQ ID NO.1所示,所述毛果楊HDA909基因編碼的氨基酸序列如SEQ IDNO.2所示。

2.一種抗鏈格孢菌植物的創制方法,其特征在于,根據權利要求1中所述的毛果楊HDA909基因序列,構建毛果楊HDA909過表達載體,采用農桿菌介導法導入受體植物,使得轉基因植物中的HDA909基因過量表達,獲得抗鏈格孢菌能力。

3.根據權利要求2所述的一種抗鏈格孢菌植物的創制方法,其特征在于,所述的受體植物是毛果楊。

4.根據權利要求2所述的一種抗鏈格孢菌植物的創制方法,其特征在于,毛果楊HDA909過表達載體的構建方法,包括以下步驟:

1)以野生型毛果楊的葉片cDNA為模板,HDA909-Primer-F和HDA909-Primer-R為引物,獲得毛果楊HDA909基因目的片段;

2)將所得毛果楊HDA909基因目的片段和pMD18-T Vector載體連接,連接產物為pMD18-HDA909;連接產物轉化到大腸桿菌感受態細胞,得到pMD18-HDA909重組質粒;

3)用BamHⅠ和KpnⅠ分別對pMD18-HDA909重組質粒和pROKⅡ質粒進行雙酶切,雙酶切后得到的HDA909基因片段和pROKⅡ載體線性片段用Gel Extraction Kit進行回收,回收產物利用T4連接酶連接,得到pROKⅡ-HDA909質粒,即為毛果楊HDA909過表達載體。

5.根據權利要求4所述的一種抗鏈格孢菌植物的創制方法,其特征在于,HDA909-Primer-F引物序列如SEQ ID NO.3所示,HDA909-Primer-R引物序列如SEQ ID NO.4所示。

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