[發(fā)明專利]一種鑒定小麥抗旱性的方法及其專用成套試劑

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011405499.6
• 申請日: 2020-12-03
• 公開（公告）號: CN112501335A
• 公開（公告）日: 2021-03-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳東升;張曉科;于銘;張維軍;魏凡;亢玲;王小亮;何進(jìn)尚;史延麗
• 申請（專利權(quán)）人: 寧夏農(nóng)林科學(xué)院農(nóng)作物研究所(寧夏回族自治區(qū)農(nóng)作物育種中心)
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;A01H1/02
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

本發(fā)明公開了一種鑒定小麥抗旱性的方法及其專用成套試劑。本發(fā)明選用全國119份小麥品種(系)，測定其相對發(fā)芽率，鑒定抗旱性；從中選取10份不同抗旱性品種，分析響應(yīng)干旱的葉片脯氨酸積累量及其與抗旱關(guān)系；通過兩組極端抗旱品種間TaP5CS基因序列比對和隨機群體驗證，開發(fā)了該基因抗旱相關(guān)分子標(biāo)記，提供了一種鑒定小麥抗旱性的方法，并利用此標(biāo)記對119份品種(系)進(jìn)行進(jìn)一步驗證，結(jié)果表明本發(fā)明開發(fā)的分子標(biāo)記可以用于小麥抗旱性的篩選與鑒定，對提高抗旱小麥品種的選育效率具有重要意義。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種鑒定小麥抗旱性的方法及其專用成套試劑。

背景技術(shù)

小麥?zhǔn)俏覈钪匾募Z食作物之一，其生產(chǎn)關(guān)系到國家糧食安全和社會穩(wěn)定。干旱是降低小麥產(chǎn)量與品質(zhì)的重要因素，提升小麥的抗旱性是小麥育種迫切需要解決的問題，抗旱相關(guān)基因分子標(biāo)記的開發(fā)可以提高選育抗旱小麥品種的效率。

植物體內(nèi)積累各種有機或無機物質(zhì)，其中有機小分子包括脯氨酸、甜菜堿等，能夠提高細(xì)胞液濃度，降低滲透勢，提高細(xì)胞吸水或保水能力，稱為滲透調(diào)節(jié)作用。脯氨酸的積累有助于增加滲透脅迫的耐受性，是高等植物應(yīng)對干旱脅迫的適應(yīng)性重要機制之一。研究發(fā)現(xiàn)高等植物中脯氨酸合成的途徑有兩條，一條是從谷氨酸開始合成，另一條是從鳥氨酸或精氨酸開始合成；干旱等逆境脅迫下，谷氨酸途徑是植物合成脯氨酸的主要途徑，在吡咯啉-5-羧酸合成酶的作用下，谷氨酸轉(zhuǎn)化為吡咯啉-5-羧酸，再經(jīng)過吡咯啉-5-羧酸還原酶的反應(yīng)最終生成L-脯氨酸。脯氨酸代謝過程中有很多酶的參與，其中吡咯啉-5-羧酸合成酶是脯氨酸合成的限速酶，受到脯氨酸的反饋抑制，對脯氨酸合成的速度起著決定性的作用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一個目的是提供檢測小麥SNP位點基因型的物質(zhì)的新用途。

本發(fā)明提供了檢測小麥SNP位點基因型的物質(zhì)在鑒定或輔助鑒定小麥抗旱性中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了檢測小麥SNP位點基因型的物質(zhì)在制備鑒定或輔助鑒定小麥抗旱性的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了檢測小麥SNP位點基因型的物質(zhì)在篩選或輔助篩選抗旱性小麥品種中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了檢測小麥SNP位點基因型的物質(zhì)在制備篩選或輔助篩選抗旱性小麥品種的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了檢測小麥SNP位點基因型的物質(zhì)在小麥育種中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了檢測小麥SNP位點基因型的物質(zhì)在制備小麥育種的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

所述SNP位點為小麥基因組序列中對應(yīng)于序列1自5’端起第2348位所示的核苷酸。

進(jìn)一步的，所述檢測小麥SNP位點基因型的物質(zhì)為如下a1)或a2)：

a1)成套試劑A；所述成套試劑A包括由序列表中序列2所示的單鏈DNA分子和序列表中序列3所示的單鏈DNA分子組成的引物對和限制性內(nèi)切酶PflmⅠ；

a2)成套試劑B；所述成套試劑B包括由序列表中序列2所示的單鏈DNA分子和序列表中序列3所示的單鏈DNA分子組成的引物對、由序列表中序列3所示的單鏈DNA分子和序列表中序列4所示的單鏈DNA分子組成的引物對和限制性內(nèi)切酶PflmⅠ。

本發(fā)明的第二個目的是提供一種鑒定或輔助鑒定小麥抗旱性的方法。

本發(fā)明提供的鑒定或輔助鑒定小麥抗旱性的方法包括如下步驟：檢測小麥SNP位點基因型，根據(jù)小麥SNP位點基因型判斷小麥的抗旱性：GG基因型的小麥的抗旱性高于AA基因型的小麥；

AA基因型為小麥基因組序列中對應(yīng)于序列1自5’端起第2348位所示的核苷酸均為A的純合體；

GG基因型為小麥基因組序列中對應(yīng)于序列1自5’端起第2348位所示的核苷酸均為G的純合體。