[發明專利]一種鑒定小麥抗旱性的方法及其專用成套試劑

在審

• 申請號: 202011405499.6
• 申請日: 2020-12-03
• 公開（公告）號: CN112501335A
• 公開（公告）日: 2021-03-16
• 發明（設計）人: 陳東升;張曉科;于銘;張維軍;魏凡;亢玲;王小亮;何進尚;史延麗
• 申請（專利權）人: 寧夏農林科學院農作物研究所(寧夏回族自治區農作物育種中心)
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;A01H1/02
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.檢測小麥SNP位點基因型的物質在鑒定或輔助鑒定小麥抗旱性中的應用；

或，檢測小麥SNP位點基因型的物質在制備鑒定或輔助鑒定小麥抗旱性的產品中的應用；

所述SNP位點為小麥基因組序列中對應于序列1自5’端起第2348位所示的核苷酸。

2.檢測小麥SNP位點基因型的物質在篩選或輔助篩選抗旱性小麥品種中的應用；

檢測小麥SNP位點基因型的物質在制備篩選或輔助篩選抗旱性小麥品種的產品中的應用；

所述SNP位點為小麥基因組序列中對應于序列1自5’端起第2348位所示的核苷酸。

3.檢測小麥SNP位點基因型的物質在小麥育種中的應用；

或，檢測小麥SNP位點基因型的物質在制備小麥育種的產品中的應用；

所述SNP位點為小麥基因組序列中對應于序列1自5’端起第2348位所示的核苷酸。

4.根據權利要求1-3任一所述的應用，其特征在于：所述檢測小麥SNP位點基因型的物質為如下a1)或a2)：

a1)成套試劑A；所述成套試劑A包括由序列表中序列2所示的單鏈DNA分子和序列表中序列3所示的單鏈DNA分子組成的引物對和限制性內切酶PflmⅠ；

a2)成套試劑B；所述成套試劑B包括由序列表中序列2所示的單鏈DNA分子和序列表中序列3所示的單鏈DNA分子組成的引物對、由序列表中序列3所示的單鏈DNA分子和序列表中序列4所示的單鏈DNA分子組成的引物對和限制性內切酶PflmⅠ。

5.一種鑒定或輔助鑒定小麥抗旱性的方法，包括如下步驟：檢測小麥SNP位點基因型，根據小麥SNP位點基因型判斷小麥的抗旱性：GG基因型的小麥的抗旱性高于AA基因型的小麥；

AA基因型為小麥基因組序列中對應于序列1自5’端起第2348位所示的核苷酸均為A的純合體；

GG基因型為小麥基因組序列中對應于序列1自5’端起第2348位所示的核苷酸均為G的純合體。

6.一種篩選或輔助篩選抗旱性小麥品種的方法，包括如下步驟：檢測小麥SNP位點基因型，GG基因型的小麥為抗旱性小麥品種；

GG基因型為小麥基因組序列中對應于序列1自5’端起第2348位所示的核苷酸均為G的純合體。

7.一種小麥育種的方法，包括如下步驟：檢測小麥SNP位點基因型，選擇GG基因型的小麥作為親本進行育種；

GG基因型為小麥基因組序列中對應于序列1自5’端起第2348位所示的核苷酸均為G的純合體。

8.根據權利要求5-7任一所述的方法，其特征在于：所述檢測小麥SNP位點基因型的方法為如下b1)或b2)：

b1)以小麥的基因組DNA為模板，采用序列表中序列2所示的單鏈DNA分子和序列表中序列3所示的單鏈DNA分子組成的引物對進行PCR擴增，得到PCR產物甲；用限制性內切酶PflmⅠ酶切所述PCR產物甲，得到酶切產物；若酶切產物大小為1894bp的單一條帶，則所述小麥SNP位點基因型為GG基因型；若酶切產物大小為1706bp和188bp的兩條帶，則所述小麥SNP位點基因型為AA基因型；

b2)以小麥的基因組DNA為模板，采用序列表中序列2所示的單鏈DNA分子和序列表中序列3所示的單鏈DNA分子組成的引物對進行PCR擴增，得到PCR產物甲；以所述PCR產物甲為模板，采用序列表中序列3所示的單鏈DNA分子和序列表中序列4所示的單鏈DNA分子組成的引物對進行PCR擴增，得到PCR產物乙；用限制性內切酶PflmⅠ酶切所述PCR產物乙，得到酶切產物；若酶切產物大小為624bp的單一條帶，則所述小麥SNP位點基因型為GG基因型；若酶切產物大小為436bp和188bp的兩條帶，則所述小麥SNP位點基因型為AA基因型。

9.權利要求4中所述的成套試劑A或成套試劑B。

10.權利要求4中所述的成套試劑A或成套試劑B在如下c1)-c6)中任一種中的應用：

c1)鑒定或輔助鑒定小麥抗旱性；

c2)制備鑒定或輔助鑒定小麥抗旱性的產品；

c3)篩選或輔助篩選抗旱性小麥品種；

c4)制備篩選或輔助篩選抗旱性小麥品種的產品；

c5)小麥育種；

c6)制備小麥育種的產品。