[發明專利]一種ABO血型正定型及RhD血型檢測卡及其制備方法

在審

• 申請號: 202011399696.1
• 申請日: 2020-12-04
• 公開（公告）號: CN112684190A
• 公開（公告）日: 2021-04-20
• 發明（設計）人: 茅培華;范迎輝;李穎
• 申請（專利權）人: 上海潤普生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/80
• 分類號: G01N33/80;G01N33/577
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種ABO血型正定型及RhD血型檢測卡，其特征在于：包括八個微柱凝膠管，八個所述微柱凝膠管包括兩管含有IgM 性質的單克隆抗A 抗體的凝膠管、兩管含有IgM 性質的單克隆抗B抗體的凝膠管、兩管含有IgM 性質的單克隆抗D抗體的凝膠管以及兩管空白凝膠管；所述凝膠均包括凝膠溶脹液和聚丙烯酰胺葡聚糖，所述凝膠溶脹液包括以下組分：

磷酸二氫鈉 0.1-0.4g/L；

磷酸氫二鈉 0.1-0.4g/L；

NaCl 1-2 g/L；

肝素鈉 3-5 g/L；

多元醇 5-8g/L；

環糊精 1-2 g/L；

甘露糖基甘油酸 0.05-0.08g/L。

2.根據權利要求1所述的一種ABO血型正定型及RhD血型檢測卡，其特征在于：所述凝膠溶脹液包括以下組分：

磷酸二氫鈉 0.2-0.3g/L；

磷酸氫二鈉 0.2-0.3g/L；

NaCl 1.4-1.6 g/L；

肝素鈉 3.5-4.5 g/L；

多元醇 6-7g/L；

環糊精 1.5-1.8 g/L；

甘露糖基甘油酸 0.06-0.07g/L。

3.根據權利要求1或2所述的一種ABO血型正定型及RhD血型檢測卡，其特征在于：所述多元醇選用山梨醇或甘露醇。

4.根據權利要求1或2所述的一種ABO血型正定型及RhD血型檢測卡，其特征在于：所述凝膠溶脹液還包括10-15mg/L防腐劑。

5.根據權利要求4所述的一種ABO血型正定型及RhD血型檢測卡，其特征在于：所述防腐劑選用硫柳汞或單辛酸甘油酯。

6.一種權利要求1-5任一所述的ABO血型正定型及RhD血型檢測卡的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1.凝膠溶脹液的配制：稱取規定量的磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、NaCl、肝素鈉、多元醇、環糊精、甘露糖基甘油酸溶于水中，得到凝膠溶脹液；

S2.凝膠制備：聚丙烯酰胺葡聚糖粉末采用4-6倍體積的步驟S1制備的凝膠溶脹液浸泡24-48h，然后洗滌3-5次，除去凝膠破損碎片和聚集的凝膠顆粒，收集顆粒大小均勻且完整呈球形凝膠顆粒，得到葡聚糖凝膠；

S3.抗體稀釋：采用生理鹽水對IgM性質的單克隆抗A抗體、IgM性質的單克隆抗B抗體、IgM 性質的單克隆抗D抗體分別進行溶解，使IgM性質的單克隆抗A抗體的效價≥128、IgM性質的單克隆抗B抗體的效價≥128、IgM性質的單克隆抗D抗體的效價≥64；

S4.凝膠的配制：將步驟S3稀釋后的三種抗體分別與步驟S2制備的葡聚糖凝膠按體積比為(1-5):1的比例混合，分別制備得到含IgM性質的單克隆抗A抗體的凝膠、含IgM性質的單克隆抗B抗體的凝膠、含IgM性質的單克隆抗D抗體的凝膠；

S5.分裝：將步驟S4制備的三種帶有抗體的凝膠和步驟S2制備的凝膠分別加入到不同微柱管中，每種凝膠分裝兩管，形成八個微柱凝膠管的ABO血型正定型及RhD血型檢測卡。

7.根據權利要求6所述的一種ABO血型正定型及RhD血型檢測卡的制備方法，其特征在于，步驟S1中，調節凝膠溶脹液pH值至6.6-6.8。

8.根據權利要求6所述的一種ABO血型正定型及RhD血型檢測卡的制備方法，其特征在于，步驟S2中，聚丙烯酰胺葡聚糖的粒徑為20-50nm。

9.根據權利要求6所述的一種ABO血型正定型及RhD血型檢測卡的制備方法，其特征在于，步驟S2中，浸泡后的聚丙烯酰胺葡聚糖采用凝膠溶脹液洗滌1-2次，再采用蒸餾水洗滌2-3次。

10.根據權利要求6所述的一種ABO血型正定型及RhD血型檢測卡的制備方法，其特征在于，步驟S5中，每個微柱管分裝20-25μL凝膠。