[發明專利]一種測定復方苦參注射液總糖含量的方法

在審

• 申請號: 202011395640.9
• 申請日: 2020-12-02
• 公開（公告）號: CN114577744A
• 公開（公告）日: 2022-06-03
• 發明（設計）人: 海麗娜;段秀梅;王洪玲;秦文杰;王紅宇
• 申請（專利權）人: 山西振東制藥股份有限公司;北京振東光明藥物研究院有限公司
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33;G01N1/28
• 代理公司: 北京市隆安律師事務所 11323
• 代理人: 劉東方

本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及一種測定復方苦參注射液總糖含量的方法，所述方法包括：(1)復方苦參注射液供試品溶液的制備，(2)D?無水葡萄糖對照品溶液的制備，(3)復方苦參注射液供試品的檢測，其中采用苯酚硫酸法或蒽酮硫酸法測定供試品溶液總糖含量；所述步驟(1)中復方苦參注射液供試品溶液的制備包括如下：復方苦參注射液加水稀釋，在大孔吸附樹脂柱進行上樣，用水洗脫，收集濾出液，加水稀釋，作為樣品溶液。本發明能提供一種改進的復方苦參注射液總糖含量的測定方法，能夠有效去除皂苷等帶有糖鏈的成分，排除非糖物質的干擾，使檢測結果更加準確、可靠。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及一種測定復方苦參注射液總糖含量的方法。

背景技術

復方苦參注射液一種由苦參和白土苓組成的中藥注射液，具有清熱利濕，涼血解毒，散結止痛的功效。主要用于癌腫疼痛、出血。

目前復方苦參注射液的研究主要集中在生物堿及黃酮類成分，對于糖類物質的研究相對較少，且近年來，中藥糖類作為一類生物活性成分，具有免疫調節、抗腫瘤、抗氧化、降血糖、抗肺癌等多種功能，已成為各類學者研究的熱點。

對于中藥中糖類的檢測多數采用苯酚硫酸法和硫酸蒽酮法測定總糖(包括多糖、單糖和糖醛酸)，但是由于該方法檢測的是存在于反應液中的單糖形式，其原理共通點為硫酸水解糖鏈，生成單糖并迅速脫水成為糠醛及衍生物，糠醛及衍生物與苯酚或蒽酮縮合形成有色反應物，這種方法的缺點在于只要中藥材中存在有糖鏈的物質例如皂苷均會產生單糖參與顯色反應，使所測含量與總糖實際含量出現偏差。目前文獻尚未發現更為效果的復方苦參注射中有關總糖含量檢測方法，其研究情況大致如下：

陳晨等人發表了近紅外透反射光譜法用于復方苦參注射液滲漉過程在線檢測(《中草藥》第44卷第1期，2013年1月，第47～51頁)，所述方法包括將滲漉液直接進行顯色后用苯酚-硫酸法進行檢測。但是，復方苦參注射液在滲漉過程中，含有非常多的雜質例如皂苷、纖維素等帶有糖鏈的物質，直接用滲漉液測定其中總糖的含量，僅是粗略的測定，所測得含量具有非常大的偏差；其次該方法若用于復方苦參注射液成品的測定，該方法中沒有總糖純化部分，故無法排除帶有糖鏈的非糖物質干擾，所測得含量仍然不準確。

陳彥旭等人發表了苦參多糖的提取分離、理化性質及免疫調節活性研究(《國際藥學研究雜志》第45卷第8期，2018年8月，第611～618頁)所述方法包括采用苯酚硫酸法測定總多糖(SFP-100)、多糖組分、多糖亞組分的糖含量。但是，該方法在測定總多糖(SFP-100)含量時，由于未經過純化步驟，含有過多帶糖鏈的非糖物質的雜質，使含量測定偏高，實驗結果不準確；測定經過DEAE-纖維素獲得的多糖組分時，該方法較大孔樹脂更繁瑣，大孔樹脂直接用水即可洗脫完成，該方法除第一步用水外，還分別需要兩步碳酸氫鈉洗脫；測定經過Sephadex G-100凝膠柱的多糖亞組分時，由于經分離純化處理最終得到的成分為總糖中的幾個具有代表性的成分，該方法僅能測定部分糖類成分，不適合總糖的測定。

因此，為更加有效測定復方苦參注射液總糖含量，開發一種改進的復方苦參注射液總糖含量測定方法，以去除皂苷等非糖物質的干擾，使檢測結果更加準確、可靠是非常必要的。

發明內容

針對以上技術現狀，本發明提供一種改進的復方苦參注射液總糖含量測定方法。具體發明如下：

本發明提供了一種測定復方苦參注射液總糖含量的方法，所述方法包括：

(1)復方苦參注射液供試品溶液的制備，(2)D-無水葡萄糖對照品溶液的制備：(3)復方苦參注射液供試品的檢測，其中采用苯酚硫酸法測定供試品溶液總糖含量；優選采用苯酚硫酸法；

本發明方法中，作為實施方案之一，所述步驟(1)中復方苦參注射液供試品溶液的制備包括如下：復方苦參注射液加水稀釋，在大孔吸附樹脂柱進行上樣，用水洗脫，收集濾出液，加水稀釋，作為樣品溶液。