[發明專利]一種測定復方苦參注射液總糖含量的方法

在審

• 申請號: 202011395640.9
• 申請日: 2020-12-02
• 公開（公告）號: CN114577744A
• 公開（公告）日: 2022-06-03
• 發明（設計）人: 海麗娜;段秀梅;王洪玲;秦文杰;王紅宇
• 申請（專利權）人: 山西振東制藥股份有限公司;北京振東光明藥物研究院有限公司
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33;G01N1/28
• 代理公司: 北京市隆安律師事務所 11323
• 代理人: 劉東方

1.一種復方苦參注射液總糖含量的檢測方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)復方苦參注射液供試品溶液的制備，(2)D-無水葡萄糖對照品溶液的制備，(3)復方苦參注射液供試品的檢測，其中采用苯酚硫酸法或蒽酮硫酸法測定供試品溶液總糖含量；優選采用苯酚硫酸法；

所述步驟(1)中復方苦參注射液供試品溶液的制備包括如下：復方苦參注射液加水稀釋，在大孔吸附樹脂柱進行上樣，用水洗脫，收集濾出液，加水稀釋，作為樣品溶液。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中大孔樹脂包括AB-8、HPD100或D101；優選AB-8。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中AB-8柱的床容積(BV)為15ml，規格為高15cm，直徑Ф1.5cm。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中進一步包括復方苦參注射液上樣量為1～3.5ml、優選1ml，上樣濃度為稀釋1～5倍、優選5倍上樣。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中進一步包括上樣后吸附0～4h；優選不進行吸附，直接洗脫。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中進一步包括用1BV～8BV、優選3BV水洗脫。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中進一步包括所述濾出液加水稀釋250-2000倍，優選650-1400倍，最佳為900-1300倍，作為樣品溶液。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中進一步包括收集濾出液至100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，精密量取1ml至10ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為樣品溶液。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中復方苦參注射液供試品溶液的制備包括如下：精密量取復方苦參注射液2ml至10ml量瓶中，用水稀釋刻度，搖勻，精密量取稀釋液5ml在AB-8大孔吸附樹脂柱上進行上樣，用水洗脫，用量為3BV，收集濾出液至100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，精密量取1ml至10ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，備用。

10.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中D-無水葡萄糖對照品溶液的制備包括如下：精密稱取D-無水葡萄糖適量，加水溶解，配成1mg/ml的對照品標準品溶液，備用。

11.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)進一步包括復方苦參注射液供試品的檢測如下：

精密量取D-無水葡萄糖樣品溶液1.0ml，空白取1.0ml蒸餾水，分別置15ml具塞試管中，加入5％苯酚溶液1.0ml，充分振搖后迅速加入濃硫酸5ml，振搖，迅速移至80℃水浴中保溫10min，冰浴中冷卻3min，顯色后3h內于485～489nm、優選487nm處測定其吸光度，并根據標準曲線計算樣品含量。

12.根據權利要求11所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)中所述標準曲線按以下方法制作：

精密稱取D-無水葡萄糖，加水溶解，配成28.0-92.0μg/ml濃度范圍內不同濃度的對照品標準系列溶液，以符合D-無水葡萄糖標準曲線的制備；

然后精密量取上述對照品標準系列溶液各1.0ml，空白取1.0ml蒸餾水，分別置15ml具塞試管中，加入5％苯酚溶液1.0ml，充分振搖后迅速加入濃硫酸5ml，振搖，迅速移至80℃水浴中保溫10min，冰浴中冷卻3min，于487nm處測定其吸光度，以吸光度值為縱坐標，濃度為橫坐標作標準曲線。

13.根據權利要求1～12任一所述的方法，其特征在于，所述方法進一步包括：

(1)復方苦參注射液供試品溶液制備：精密量取復方苦參注射液2ml至10ml量瓶中，用水稀釋刻度，搖勻，精密量取稀釋液5ml在AB-8柱上樣，用水洗脫，用量為3BV，收集濾出液至100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，精密量取1ml至10ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，備用；

(2)D-無水葡萄糖對照品溶液的制備包括如下：精密稱取D-無水葡萄糖適量，加水溶解，配成1mg/ml的對照品溶液；然后配置成28，44，60，76，92μg/ml的對照品標準系列溶液；

(3-1)稱取苯酚，加入碳酸氫鈉，常壓蒸餾，接收餾分，放置陰涼干燥處，備用；然后稱取此餾分苯酚5g，加水溶解，轉移至100ml棕色量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得5％苯酚溶液，備用；

(3-2)復方苦參注射液樣品溶液的檢測：精密量取樣品溶液1.0ml，空白取1.0ml蒸餾水，分別置15ml具塞試管中，加入5％苯酚溶液1.0ml，充分振搖后迅速加入濃硫酸5ml，振搖，迅速移至80℃水浴中保溫10min，冰浴中冷卻3min，于487nm處測定其吸光度，并根據標準曲線計算樣品含量。