[發(fā)明專利]一種同時測定血漿中維生素A、維生素E和25-羥基維生素D的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011393080.3
• 申請日: 2020-12-02
• 公開（公告）號: CN112557539A
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發(fā)明（設計）人: 鐘志松;焦青;賈永娟;萬哲見;劉世文
• 申請（專利權）人: 成都和合醫(yī)學檢驗所有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
• 代理公司: 成都熠邦鼎立專利代理有限公司 51263
• 代理人: 寧波

1.一種同時測定血漿中多種脂溶性維生素的方法，其特征在于，采用液相色譜串聯(lián)質譜法進行檢測，檢測的色譜條件如下：

色譜柱：F5色譜柱；

流動相：流動相A為含體積分數(shù)為0.1%甲酸和1mM甲酸銨的甲醇溶液；B為體積分數(shù)為0.1%的甲酸水溶液；

梯度洗脫程序為：0-2.7min，78%A；2.71-4.00min，97%A，4.01-4.8min，78% A。

2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于：所述脂溶性維生素為維生素A、維生素E、25-羥基維生素D2、25-羥基維生素D3和/或3-epi-25-羥基維生素D3。

3.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于：所述色譜柱的規(guī)格為：長度50mm，內徑3mm，填料粒徑2.6μm；優(yōu)選的色譜柱型號為Phenomenex Kinetex F5色譜柱。

4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于：

質譜條件為：離子源：ESI；霧化氣流量：3L/min；加熱氣流量：5L/min；

接口溫度：350℃；DL溫度：150℃；加熱塊溫度：450℃；

干燥氣流量：15L/min。

5.根據(jù)權利要求1-4任意一項所述的方法，其特征在于：操作步驟如下：

a.供試品溶液制備：取待檢血漿，加入乙醇、正己烷，萃取后離心，取上清液，氮氣吹干，加入70%甲醇復溶，備用；

b.標準品溶液制備：取各維生素標準品，乙醇溶解，混合，稀釋，備用；

c.分別將供試品溶液、標準品溶液進行液相色譜串聯(lián)質譜法檢測；

d.根據(jù)檢測結果計算得到各自脂溶性維生素成分含量。

6.根據(jù)權利要求5所述的方法，其特征在于：

步驟a中，乙醇溶解時，加入內標溶液；待檢血漿與乙醇的體積比為1:3。

7.根據(jù)權利要求5所述的方法，其特征在于：

步驟a中，待檢血漿與正己烷的體積比為1:140。

8.根據(jù)權利要求5所述的方法，其特征在于：

步驟b中，所述稀釋的溶液為體積分數(shù)為70%的甲醇水溶液。

9.根據(jù)權利要求5-8任意一項所述的方法，其特征在于：步驟c中，檢測時的進樣量為20μL。