[發明專利]能降低玉米中α醇溶蛋白的靶點基因及其應用

在審

• 申請號: 202011391351.1
• 申請日: 2020-12-02
• 公開（公告）號: CN113637677A
• 公開（公告）日: 2021-11-12
• 發明（設計）人: 宋任濤;祁巍巍;霍真真;谷雅靜;王敏芝;陳璇
• 申請（專利權）人: 上海大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12N15/82;C12N15/66;A01H5/00;A01H6/46
• 代理公司: 上海上大專利事務所(普通合伙) 31205
• 代理人: 于慧

1.一種能降低玉米中α醇溶蛋白的靶點基因，其特征在于：該靶點基因為SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核酸序列中任意一種或兩種。

2.根據權利要求1所述的能降低玉米中α醇溶蛋白的靶點基因，其特征在于：該靶點基因為SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核酸序列中任意兩種。

3.根據權利要求1所述的能降低玉米中α醇溶蛋白的靶點基因，其特征在于：該靶點基因為SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核酸序列或SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核酸序列。

4.一種表達載體，其特征在于：該表達載體含有根據權利要求1、2或3中任一項所述的能降低玉米中α醇溶蛋白的靶點基因。

5.根據權利要求4所述的表達載體，其特征在于該表達載體為SEQ ID NO.5或SEQ IDNO.6所示的核酸序列。

6.一種構建根據權利要求5所述的表達載體的方法，其特征在于：該方法的具體步驟為：將分別帶有敲除19kD和22kDα醇溶蛋白基因雙靶點的tRNA-gRNA連入轉基因載體中獲得所需的表達載體，其中所述的轉基因載體經過改造，以玉米U6啟動子和終止子表達gRNA，同時以玉米泛素啟動子和NOS終止子表達玉米密碼子優化的Cas9蛋白。

7.一種根據權利要求1、2或3中任一項所述的能降低玉米中α醇溶蛋白的靶點基因在降低玉米中α醇溶蛋白含量，提高賴氨酸含量中的應用。