[發(fā)明專利]一種基于海洋多糖載體的花色苷納米粒子及其制備方法和在靶向遞送中的應用

有效

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• 申請日: 2020-12-02
• 公開（公告）號: CN112494435B
• 公開（公告）日: 2022-04-01
• 發(fā)明（設計）人: 譚明乾;趙雪;張雪迪;鐵珊珊;曹紀鋆;李運
• 申請（專利權）人: 大連工業(yè)大學
• 主分類號: A61K9/19
• 分類號: A61K9/19;A61K31/352;A61K47/36;A61K47/46;A61K49/00;A61P39/06;B82Y20/00;B82Y30/00;B82Y40/00
• 代理公司: 大連格智知識產權代理有限公司 21238
• 代理人: 劉琦

本發(fā)明提供一種基于海洋多糖載體的花色苷納米粒子，以海洋多糖、食源性熒光納米粒子、透明質酸作為復合載體與花色苷結合，制備方法為：S1、將海藻酸鈉溶解在磷酸鹽緩沖鹽水中，依次加入的EDC和HOBt及食源性熒光納米粒子，得到熒光?海藻酸復合物；S2、將所述熒光?海藻酸復合物加入到DMF和DCM混合物中，再加入DIC和DMAP；S3、加入花色苷和所述透明質酸后除去溶劑；S4、除去未反應的小分子，并冷凍干燥。本發(fā)明可提高花色苷穩(wěn)定性，控制花色苷緩慢釋放，具有熒光示蹤特性，可作為熒光標記用于動物組織和器官等活體成像，還可以靶向遞送至動物結腸部位，緩解由DSS誘導的結腸炎癥損傷。

技術領域

本發(fā)明涉及納米技術領域，更具體地說，涉及一種基于海洋多糖載體的花 色苷納米粒子及其制備和在熒光示蹤與結腸靶向遞送中的應用。

背景技術

花色苷是一種屬于類黃酮類的生物活性化合物，通過植物性食品存在于人 體營養(yǎng)中，越橘的果實成分中含有豐富的花色苷類物質。具有較強的抗氧化特 性，經常食用具有健康益處。但是pH、溫度等環(huán)境條件對花色苷的顏色穩(wěn)定性 和性質有很大的影響。現(xiàn)有技術制備的花色苷穩(wěn)定性差，尤其是乳化法制備的 海藻酸鈉微球，在上消化道的停留時間不足，導致生物利用率低，需要改善。

納米技術作為生物活性化合物的納米封裝的主要應用，在食品工業(yè)等多種 領域中迅速發(fā)展。納米封裝技術定義為生物活性成分被涂層載體材料封裝并在 正確的時間和位置遞送核心的過程。在納米封裝過程中，除了具有生物活性外， 納米封裝還可以通過將顆粒尺寸減小到納米范圍(通常小于1μm)而提高其表 面體積比，相較于一般包埋法制備的微球進一步提高其生物利用度，能夠更好 的控制緩釋，具有較好的利用前景。

因此發(fā)明一種利用納米技術進一步提高花色苷穩(wěn)定性、解決更精準的控制 花色苷緩釋和定點釋放的難題同時具有熒光示蹤特性的花色苷納米粒子尤為重 要。

發(fā)明內容

本發(fā)明提供一種基于海洋多糖載體的花色苷納米粒子及其制備和在熒光示 蹤、結腸靶向遞送中的應用，以解決現(xiàn)有技術中越橘花色苷穩(wěn)定性差，且功能 活性成分易受到損失的問題，以及花色苷納米粒子預處理對脂多糖(LPS)介導 的RAW 264.7巨噬細胞凋亡的保護和緩解由葡聚糖硫酸鈉(DSS)誘導的結腸 炎癥損傷方面的應用。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提出一種基于海洋多糖載體的花色苷納米粒子， 所述花色苷納米粒子以海藻酸鈉、食源性熒光納米粒子、透明質酸作為復合載 體與花色苷結合。

優(yōu)選的，所述多糖包括海藻酸鈉。

一種基于海洋多糖載體的花色苷納米粒子的制備方法，包括以下步驟：

S1、將海藻酸鈉溶解在pH值為4.75～6磷酸鹽緩沖鹽水中，依次加入的 EDC和HOBt，室溫下攪拌60～80min后，加入所述食源性熒光納米粒子，攪拌 24～30h，再用去離子水透析24～72h并冷凍干燥，得到熒光-海藻酸復合物；

S2、將所述熒光-海藻酸復合物加入DMF和DCM的混合物中，向其中加入 按體積比1：1～1.5混合的DIC和DMAP，在室溫下攪拌1～1.5h；

S3、再加入花色苷和所述透明質酸，在室溫下反應24～30h，用DCM洗滌 3～5次，并蒸發(fā)除去溶劑；

S4、用DMF洗滌，并用DMF透析20-30h除去未反應的小分子和DMF， 在-80℃預冷2～3h，在-50～-55℃、真空度35～45Pa、冷凍干燥24～72h。

優(yōu)選的，步驟S3中所述蒸發(fā)條件為溫度25～40℃、真空度范圍0.29～1.6mbar。

優(yōu)選的，步驟S4中所述除去未反應的小分子的方法包括先用DMF洗滌再 用DMF透析；所述除去DMF的方法包括用去離子水透析。

優(yōu)選的，步驟S1、S2中所述攪拌轉速500-800r/min。