[發明專利]一種氘標記的去甲烏藥堿穩定性同位素化合物的制備方法

在審

• 申請號: 202011374282.3
• 申請日: 2020-11-30
• 公開（公告）號: CN112409257A
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發明（設計）人: 張磊;韓世磊
• 申請（專利權）人: 天津阿爾塔科技有限公司
• 主分類號: C07D217/20
• 分類號: C07D217/20
• 代理公司: 天津企興智財知識產權代理有限公司 12226
• 代理人: 張會雪

本發明涉及一種氘標記的去甲烏藥堿穩定性同位素化合物的制備方法，本發明以化合物(I)為起始原料，經D?H交換、氘代還原、脫保護基合成同位素標記關鍵中間體(IV)，再經Pictet?Spengler關環反應合成中間體(VI)，最終再脫保護基反應，得到去甲烏藥堿?D4(VII)。本發明所述的制備方法通過常規化學反應，5步反應得到目標產物，工藝設計合理，原料價格便宜，節約成本，實驗過程可控，操作簡便，制備得到的目標產物純度高，達到98％以上，總收率達到28.0％左右，且反應步驟中對中間體的同位素豐度監控，均可達到96％以上，沒有同位素豐度稀釋現象，重現性和穩定性更高。

技術領域

本發明屬于藥物合成技術領域，尤其是涉及一種去甲烏藥堿的同位素內標的制備方法。

背景技術

去甲烏藥堿最初是由Kosuge等人從日本附子中分離提取得到的，研究表明：去甲烏藥堿對心血管系統的作用很強，能使心率加快，舒張壓降低，明顯增加冠脈血流量，改善竇房結傳導功能等。在心血管方面的獨特的藥理作用及顯著的治療效果，具有極大的治療價值。在臨床上長會用作強心劑、利尿劑、鎮痛劑和降壓劑等，服用或者誤服將會對運動員的成績造成較大影響。

世界反興奮劑機構(World Anti-Doping Agency，WADA)在《2019年禁用清單國際標準》中已將HG明確列為β2激動劑類禁用物質。2019年8月中國體育總局反興奮劑中心關于印發《大型賽事食源性興奮劑》防控工作指南(暫行)》的通知中，明確規定了要檢測沙丁胺醇、萊克多巴胺、沙美特羅、克倫丙羅、去甲烏藥堿和曲托奎酚等β2激動劑。近年來在興奮劑檢查中頻繁發生運動員去甲烏藥堿陽性事件。中國體育總局反興奮劑中心通過初步調查研究，發現某些藥品和食品中均含有去甲烏藥堿成分。多種膏藥、蓮子、熱帶水果釋迦，甚至一款英國著名護膚品牌下的藍莓美白身體乳都含有該物質。因此，有效的檢測手段運用于各種食材的檢測以及人體代謝物的檢測，顯得尤為重要。日前，關于去甲烏藥堿的檢測方法主要有HPLC-UV法、HPLC-FLD法、HPLC ECD法和LC-MS法等。上述各方法均有種種缺陷，盡管LCMS方法相較于前者靈敏度較高、通用性較強，廣泛應用于運動員的血樣、尿樣以及各類保健品和食品的分析中，但是其靈敏度還是有一定的局限性，對違禁品濃度有一定的要求，當濃度低于檢測閾值時，就無法滿足要求，而同位素稀釋質譜法(Isotope Dilution MassSpectrometry,IDMS)很好的解決了這一問題。

同位素稀釋質譜法(Isotope Dilution Mass Spectrometry,IDMS)采用穩定性同位素標記化合物作為內標試劑，很好地結合了色譜的分離能力和質譜的定性能力，己被定為國際上食品安全檢測最權威的仲裁檢測方法，并被美國、歐盟、日本等發達國家列為相關檢驗標準。該方法最早是由Rittenberg等人在1940年提出的，Gest等人于1947年對其做出了理論上的闡述，而1956年Hintenberge在此基礎上進一步討論了該方法的計算公式，標志著同位素稀釋質譜法這一方法的正式成熟。1997年，國際質量咨詢委員會(CCQM)在巴黎召開第六次會議，將同位素稀釋質譜法、電位滴定、精密庫倫、重量法和凝固點下降法定位于化學測量的五個基準方法，其中IDMS是唯一一種可用于微量、痕量和超痕量元素權威的測量方法。同位素稀釋質譜法的原理為：將己知質量和豐度的濃縮穩定同位素作為稀釋劑加入樣品中混合均勻，用質譜儀測定樣品中同位素的豐度比，即可計算待測元素在樣品中的濃度。在整個分析檢測過程中，只要保證稀釋劑加入并與待測物混合均勻達到化學平衡，其同位素豐度比值就會達到一個恒定值，測定前的樣品損失、不定量分離也會因對待測物和稀釋劑的豐度產生相同的貢獻而相互抵消，從而不會對分析結果造成影響。因此該方法是一種準確度和精度高的分析方法。穩定同位素標記試劑作為內標試劑應用于同位素稀釋質譜法時，一般要求有至少3個質量數的差異。