[發明專利]一種具有防治草地貪夜蛾功能的微生物菌劑及其制備方法

在審

• 申請號: 202011373320.3
• 申請日: 2020-11-30
• 公開（公告）號: CN112352792A
• 公開（公告）日: 2021-02-12
• 發明（設計）人: 趙崇鈞;楊潤霞;毛明林;李誠;何月秋;郭紹青;趙榮彪
• 申請（專利權）人: 云南省微生物發酵工程研究中心有限公司
• 主分類號: A01N63/22
• 分類號: A01N63/22;A01P7/04;C12N1/20;C12R1/125
• 代理公司: 昆明鴻昊知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 53211
• 代理人: 陳芃綦

本發明公開了一種具有防治草地貪夜蛾功能的微生物菌劑，包括離心菌體、助劑和離心菌體上清液。一種具有防治草地貪夜蛾功能的微生物菌劑的制備方法，包括菌體制備、菌液制備和菌液成品步驟。本發明提供的微生物菌劑有較強的選擇性，本申請中的功能菌種枯草芽孢桿菌WSWFJ38具有對人畜等靶標以外生物(非靶標生物)安全無害的特點，甚至對天敵昆蟲也是安全的，是由自然界中篩選分離得到，未進行基因改造，田間使用不具有風險，可在土壤中自然快速分解，對作物、動物和人體均不產生危害，可實現田間、作物、水源無污染、無殘留，與常規殺蟲農藥相比安全性大大提高，有利于有機農業的發展。

技術領域

本發明屬于害蟲防治技術領域，尤其涉及一種具有防治草地貪夜蛾功能的微生物菌劑及其制備方法。

背景技術

草地貪夜蛾Spodoptera frugiperda(J.E.Smith),又稱秋黏蟲,屬鱗翅目Lepidoptera夜蛾科Noctuidae灰翅夜蛾屬Spodoptera,是一種原產于美洲熱帶和亞熱帶地區的雜食性害蟲。我國于2019年1月11日前次于云南江城縣發現該蟲的為害，且能在我國多數省、市、自治區為害。草地貪夜蛾不僅取食為害玉米，還可取食大麥、水稻、花生、甜菜、大豆、煙草、番茄、馬鈴薯、白菜、小麥等80余農作物種植物。

草地貪夜蛾生命周期包括卵、幼蟲、蛹和成蟲4個蟲態，取食為害階段為幼蟲期，以6齡幼蟲為害最為嚴重，低齡幼蟲(1～3齡)取食玉米葉片形成半透明薄膜“窗孔”，高齡幼蟲(4～6齡)取食形成不規則的長形孔洞，高齡幼蟲也會取食玉米雄穗和果穗。由于化學藥劑和物理防控對于病害的防治效果較差，基于生物產業的快速發展，采用農用微生物菌劑進行枯萎病的防控，既能避免農作物產生抗藥性，又能實現綠色環保無殘留，所以研制一株高效防草地貪夜蛾的功能菌劑及其制成的防控產品對于農業的健康持續發展尤為重要。

發明內容

本發明的第一目的在于提供一種具有防治草地貪夜蛾功能的微生物菌劑；第二目的在于提供一種具有防治草地貪夜蛾功能的微生物菌劑的制備方法。

本發明的第一目的是這樣實現的：具有防治草地貪夜蛾功能的微生物菌劑，包括以下重量份的組分：離心菌體45～55份、助劑35～40份、離心菌體上清液10～15份；其中,所述離心菌體中的菌體為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)WSWFJ38，保藏號為CGMCCNo.20143。

所述微生物菌株已于2020年06月28日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，菌株名稱為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)WSWFJ38，保藏號為CGMCC No.20143。

本發明的第二目的是這樣實現的：包括菌體制備、菌液制備和菌液成品步驟，具體為

1)菌體制備，先取-80℃下保存的保藏號為CGMCC No.20143的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)WSWFJ38菌株在LB固體培養基上活化12～16h活化的得菌株；其次，取菌株置于LB液體培養基中，在溫度為35℃、轉速為160rpm/min條件下培養24h活化得種子液；隨后取種子液置于發酵料培養中，中溫度為36.5℃～37.5℃條件下，轉速為120rpm/min條件下培養25～30h得發酵液；最后以離心機轉速6000rpm/min條件下離心15min得到離心菌體；

2)菌液制備，取步驟1)制得的離心菌體、離心菌體上清液，以及由潤濕分散劑、醇類抗凍劑、增稠劑和非離子表面活性劑組成的助劑混合攪拌均勻得到菌液，三者的重量百分比為：離心菌體45～55份、離心菌體上清液10～15份、助劑35～40份；

3)菌液成品，取步驟2)制得的菌液加入稀釋劑稀釋得枯草芽孢桿菌菌懸液成品，即為防治草地貪夜蛾功能的微生物菌劑。